[发明专利]快速筛选硅酸盐细菌的方法在审
申请号: | 201310138722.9 | 申请日: | 2013-04-19 |
公开(公告)号: | CN104109641A | 公开(公告)日: | 2014-10-22 |
发明(设计)人: | 赵恒勤;贺治国;张耀;胡四春;王龙 | 申请(专利权)人: | 中国地质科学院郑州矿产综合利用研究所;中南大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;丁金玲 |
地址: | 450006 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明涉及一种快速筛选硅酸盐细菌的方法,其包括以下步骤:(1)土壤菌悬液获得;(2)富集培养,采用逐步提高铝土矿添加量的方法对硅酸盐细菌富集培养;(3)分筛培养,根据菌落长出的时间以及菌落的形态,从培养基平板上挑出黏液状凸起的透明菌落,进行再培养,直到获得纯培养;(4)复筛。本发明采用逐步提高铝土矿添加量的方法,使细菌更容易适应硅酸盐环境,从而富集到更多的硅酸盐细菌。采用涂抹CaCO3粉末于平板表面的方法让CaCO3不至沉淀平板底部,使筛选产酸菌可视化。培养基中微量添加的固体FeCl3改为用FeCl3溶液,使其更易被细菌利用。本发明为在实验室中快速筛选驯化硅酸盐细菌提供了一种快速便捷的方法。 | ||
搜索关键词: | 快速 筛选 硅酸盐 细菌 方法 | ||
【主权项】:
一种快速筛选硅酸盐细菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)土壤菌悬液获得:将铝土矿粉末加入到无菌水中,振荡后静置,取上清液加入到液体无氮培养基中;(2)富集培养:将步骤(1)中由液体无氮培养基培养所得菌种于液体无氮培养基中进行转接培养,共转接4次,转接量按体积百分比计,每次培养液的10%接种于铝土矿添加量逐渐增加的液体无氮培养基中;(3)分筛培养:将步骤(2)中的最后一次转接培养的培养液稀释106‑108倍后,涂布于固体无氮培养基中,置于30℃恒温培养箱中培养24h,待固体无氮培养基平板表面不再有水滴时,倒置平板,培养3‑5天,随时观察细菌菌落生长情况;根据菌落长出的时间以及菌落的形态,从培养基平板上挑出黏液状凸起的透明菌落,进行再培养,直到获得纯培养;(4)复筛:将步骤(3)中得到的纯菌种接种于液体含氮培养基中,能够分解硅酸盐和铝硅酸盐组成的岩石矿物的细菌即为硅酸盐细菌。
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