[发明专利]一种中药淫羊藿总黄酮磷酸化分子修饰方法

摘要

本发明涉及一种中药淫羊藿总黄酮磷酸化分子修饰方法，属于中兽药制备技术领域。采用三聚磷酸钠-三偏磷酸钠法磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮，以产物中总黄酮含量和磷酸根含量为指标，采用正交设计法研究了pH、反应温度、反应时间三个因素水平并对其进行优选，确定最佳修饰条件为：反应温度70℃、反应时间6h、反应pH＝9的条件下制备磷酸化淫羊藿总黄酮，所得淫羊藿总黄酮磷酸化物经红外光谱分析为淫羊藿总黄酮磷酸酯，其中磷酸根和总黄酮含量高，产物得率高，而且入水即溶，对体外培养肝细胞的安全浓度显著增大。本发明所获得淫羊藿总黄酮磷酸酯具有良好的水溶性和较高的得率，安全性好。

主权项

一种淫羊藿总黄酮的磷酸化分子修饰方法，采用三聚磷酸钠‑三偏磷酸钠法磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮。(1)按三聚磷酸钠∶三偏磷酸钠＝5∶2的比例精确称取2.5000g三聚磷酸钠和1.0000g三偏磷酸钠，溶于50ml蒸馏水中；精密称取500mg淫羊藿总黄酮(总黄酮含量62.22％)加入100ml蒸馏水中，充分混匀后加入配好的三聚磷酸钠‑三偏磷酸钠混合液50ml，调节pH＝8～10，置恒温水浴锅内，反应温度70℃～90℃、反应时间4～8h，反应结束后，将反应物先用自来水透析48h，再用蒸馏水透析24h，冷冻干燥后得磷酸化淫羊藿总黄酮。(2)上述方法磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮的条件为：反应pH＝8～10、反应温度70℃～90℃、反应时间4～8h。(3)按照上述方法磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮的最佳条件为：反应pH＝9、反应温度70℃、反应时间6h。(4)在最佳条件下磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮，其产物中总黄酮含量达36.41％，磷酸根含量可达34.85％，产物得率达124.18％。(5)在最佳条件下磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮，其产物的红外光谱图基本形状与修饰前一致，未发生根本性改变，均具有黄酮特征吸收峰，除黄酮母体特征峰得到保留之外，在1160.61cm‑1出现了一个磷酸酯的特征吸收峰，在918.15cm‑1处出现的亚磷酸酯特征吸收峰明显比修饰前的峰变大，表明本法中磷酸化分子修饰淫羊藿总黄酮产物为淫羊藿总黄酮磷酸酯。(6)在最佳条件下制备的淫羊藿总黄酮磷酸酯具有良好的水溶性，入水即溶。(7)在最佳条件下制备的淫羊藿总黄酮磷酸酯对体外培养的鸭胚肝细胞的毒性较淫羊藿总黄酮显著降低。