[发明专利]一种基于Au DENPs-LA的肝癌靶向CT造影剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种基于Au DENPs-LA的肝癌靶向CT造影剂的制备方法，包括：以荧光素修饰氨基末端的第五代聚酰胺-胺树状大分子；随后通过聚乙二醇将乳糖酸连接至树状大分子；以修饰后的树状大分子为模板，通过硼氢化钠还原制备金纳米颗粒；对树状大分子表面剩余的氨基进行全部乙酰化处理；将反应后的溶液进行透析，冷冻干燥处理得到终产品；对产品进行体外、体内CT造影性能进行评价。本发明方法简单易行，制备得到的乳糖酸修饰的树状大分子包裹纳米金颗粒具有良好的稳定性、水溶液分散性和生物相容性，显示良好的体外肝癌细胞靶向效果，具有特异性的靶向肿瘤CT造影效果，具有潜在的靶向CT造影应用前景。

主权项

一种基于Au DENPs‑LA的肝癌靶向CT造影剂的制备方法，包括：（1）将第五代聚酰胺‑胺树状大分子G5.NH2加入溶剂中，得到溶液，然后加入异硫氰酸荧光素FITC，搅拌反应12‑24h，透析，冷冻干燥，得到荧光素修饰的树状大分子G5.NH2‑FI；其中树状大分子和FITC的摩尔比为1:5；（2）将乳糖酸LA‑COOH加入溶剂中，得溶液，加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS，搅拌反应1‑3h，然后加入聚乙二醇溶液中，搅拌反应2‑3d，透析，冷冻干燥处理，得到聚乙二醇‑乳糖酸LA‑PEG‑COOH；其中乳糖酸LA‑COOH、EDC、NHS的摩尔比为1：1：1；乳糖酸和聚乙二醇的摩尔比为1.5:1；（3）将上述LA‑PEG‑COOH配制成水溶液后，加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS，搅拌反应1‑3h，然后加入G5.NH2‑FI的水溶液中，搅拌反应1‑3d，透析，冷冻干燥，得到乳糖酸修饰的树状大分子G5.NH2‑FI‑PEG‑LA；其中G5.NH2‑FI和LA‑PEG‑COOH摩尔投料比为1:15‑20；LA‑PEG‑COOH、EDC和NHS的摩尔比为1:5‑6:5‑6；（4）将上述G5.NH2‑FI‑PEG‑LA配制成水溶液，加入氯金酸水溶液，搅拌10‑30min，加入硼氢化钠溶液，搅拌1‑2h，加入三乙胺，搅拌10‑30min，加入乙酸酐，搅拌反应24‑36h，透析，冷冻干燥，即得乳糖酸修饰的树状大分子包裹的纳米金颗粒Au DENPs‑LA，其中氯金酸和G5.NH2‑FI‑PEG‑LA的摩尔比为150:1；硼氢化钠和氯金酸的摩尔比为3:1；三乙胺为树状大分子末端氨基摩尔数6‑12倍；乙酸酐为树状大分子末端氨基摩尔数5‑10倍。