[发明专利]一种抑制胃癌干细胞增殖的生物活性肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种抑制胃癌干细胞增殖的生物活性肽的制备方法，其包括从动物脏器中提取分离生物活性肽的步骤。本发明的方法操作简单，易于规模化和工业化生产，而且通过本发明的方法所制备的生物活性肽，能够有效的抑制胃癌干细胞增殖。

主权项

一种抑制胃癌干细胞增殖的生物活性肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤：一、选取中低分化人胃癌肿瘤组织，无菌条件下清洗后加入生理盐水粉碎、研磨后离心取无细胞上清液备用；二、取1‑3岁雄性山羊，在背部、足趾部多位点注射胃癌组织提取液，每周一次，每个部位0.2微升，连续注射4‑6周后宰杀放血，在相对无菌条件下剥取肝脏；三、组织称重，低温(0‑4℃)条件下粉碎、研磨组织，9000‑10000转/分离心10‑25分钟，取上清液，使用纱布+脱脂棉过滤，过滤后滤液采用F14超滤器进行超滤，收集分子量在1万以下的部分；四、进行中低压色谱进一步分离、纯化，获得三个成分，收集第三个色谱峰所代表的成份，即得生物活性肽；其中中低压色谱分离条件为：(1)、流动相：A液：0.1％三氟乙酸的水溶液；B液：0.05％三氟乙酸的乙腈溶液；(2)、固定相：ODS色谱柱。