[发明专利]西南桦叶芽外植体采集与诱导方法

摘要

西南桦叶芽外植体的采集与诱导方法，属于植物无性繁殖技术领域。包括如下步骤：(1)选取5年生以上的西南桦优树作母树；(2)在8-10月，清除母树周围直径5m范围内的杂草、灌木，使树干充分接受阳光照射，同时配制浓度为5mg/L的6-苄基腺嘌呤溶液对树干基部的形成层保持输液30天以上；(3)在10-12月剪取树干基部2m以下萌生的2～3cm长的健壮叶芽作外植体，先用3％的洗衣粉水浸泡20min，然后在超净工作台上用75％的酒精消毒10～15s，再用10％的H2O2消毒7～10min，最后用无菌水冲洗5～7遍；(4)将叶芽接种于外植体的诱导培养基上，培养时间40～60天，诱导成功率50％以上。

主权项

西南桦叶芽外植体采集与诱导方法，包括如下步骤：(1)优良母树的选择。采集叶芽的母树必须是5年生以上的西南桦优树；(2)树干基部叶芽的促萌方法。在8‑10月，对选中的母树周围直径5m范围内的杂草、灌木进行清除，使树干充分接受阳光照射，同时配制浓度为5mg/L的6‑苄基腺嘌呤(6‑BA)溶液，采用医用输液瓶挂在树干2m高度用医用输液管对树干基部的形成层保持输液30天以上，促其萌芽；(3)外植体材料的采集处理。在10月至12月，用剪刀剪取树干基部2m以下萌生的2～3cm长的健壮幼嫩叶芽，剪去除顶芽以外的叶片后作为组织培养外植体。叶芽外植体先用3％的洗衣粉水浸泡20min，然后在超净工作台上用75％的酒精消毒10～15s，再用10％的H2O2消毒7～10min，最后用无菌水冲洗5～7遍，直到冲洗干净为止；(4)外植体的诱导培养。将洗净并消毒处理后的叶芽外植体垂直接种于外植体的诱导培养基上(培养基组成见表1)，培养基pH值为5.8～6.2，培养温度23～28℃，采用日光灯或自然光源照射进行光照培养，光照强度3000～5000lx，每天光照时间10～14小时，湿度70～80％，培养时间40～60天。