[发明专利]检测耳聋相关线粒体T7505C突变的试剂盒及应用有效
| 申请号： | 201310172063.0 | 申请日： | 2013-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN103266169A | 公开（公告）日： | 2013-08-28 |
| 发明（设计）人： | 管敏鑫;蒋萍萍;冀延春;郑静;梁敏;徐静 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 张法高;赵杭丽 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供一种检测耳聋相关的线粒体DNA T7505C突变的试剂盒，由DNA提取混合液、扩增T7505C片段的PCR混合液、针对T7505C设计的一对外引物、针对T7505C设计的一对内引物、限制性内切酶、阳性对照、阴性对照和盒体组成。本发明运用蛋白酶K消化裂解法，从少量标本中快速提取基因组DNA，不仅解决了传统上从耳聋患者血液中提取DNA的问题，减轻被检者的痛苦；而且还解决了跨地区传递样本的问题。本发明的试剂盒应用成本低，检测流程简便、快速，结果判读直观，应用本发明可确保检测结果的特异性和稳定性，可在检测与耳聋相关的线粒体基因tRNAGlnT7505C突变中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 耳聋 相关 线粒体 t7505c 突变 试剂盒 应用 | ||
【主权项】：
一种检测耳聋相关的线粒体DNA T7505C突变的试剂盒，其特征在于，该试剂盒由DNA提取混合液（1）、扩增T7505C片段的PCR混合液（2）、针对T7505C设计的一对外引物（3）、针对T7505C设计的一对内引物（4）、限制性内切酶（5）、阳性对照（6）、阴性对照（7）和盒体（8）组成，其中，DNA提取混合液（1）主要由细胞裂解液、蛋白酶K、氯仿、苯酚、无水酒精组成；扩增T7505C片段的PCR混合液（2）由脱氧单核苷酸、10×PCR缓冲液、MgCl2、三蒸水和Taq酶组成，针对T7505C设计的一对外引物（3）由外前向引物F: ACG CCA AAA TCC ATT TCA CT (SEQ ID NO:1)和外反向引物R: CGG GAA TTG CAT CTG TTT TT (SEQ ID NO:2)构成；针对T7505C设计的一对内引物（4）由内前向引物F: TAGACAAAAAAGGAAGGAATCGAACCCCCCAAAGCTGGTTTCAAGCCAACCGCTTGGCCTCCA (SEQ ID NO:3)和内反向引物R: ATGTGCCATTAAGATATATAGG (SEQ ID NO:4)构成；限制性内切酶（5）为限制性内切酶Nla Ⅲ；阳性对照（6）是含有线粒体序列第7505位点发生T>C突变的酶切样本；阴性对照（7）是不含有线粒体序列第7505位点发生T>C突变的酶切样本。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学，未经浙江大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201310172063.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种嵌入型可拆卸活动主针针夹及针块
- 下一篇：一种钢管均匀冷却装置
