[发明专利]一种人补体C1q/TNFα相关蛋白‑2（hCTRP2）的抗原肽及其抗体

摘要

本发明公开了一种人补体C1q/TNFα相关蛋白‑2（hCTRP2）的抗原肽及其抗体，主要包括以下步骤合成C1q/TNFα相关蛋白‑2的N‑端及C‑端抗原肽各一段，将抗原肽分别与牛血清白蛋白（BSA）和钥孔血蓝蛋白（KLH）进行化学耦联；将KLH耦联的抗原肽免疫大白兔，制备抗血清；将BSA耦联的抗原肽包被酶联免疫吸附剂测定（ELISA）板，测定抗血清的效价；将效价最高的C‑端抗原肽免疫所得抗血清用硫酸铵分级沉淀，初步纯化抗血清；制备与溴化氰活化树脂耦联的耦联BSA的C‑端抗原肽亲合纯化层析柱，对经初步纯化的抗血清进行亲合纯化；以全长或球状人补体C1q/TNFα相关蛋白‑2为检测对象，对纯化抗体的特异性进行分析，结果表明上述方法制备的抗体具有很高的灵敏度和特异性（如摘要附图所示）。

主权项

一种人补体C1q/TNFα相关蛋白‑2（hCTRP2）的抗原肽，所述的抗原肽对由以下步骤产生：经NCBI数据库和抗原肽分析软件分析及抗原肽的优选结果，合成了hCTRP2的N‑端抗原肽和C‑端抗原肽各一段，N‑端抗原肽的氨基酸序列是59DRGDSGEEGPP69，C‑端抗原肽氨基酸序列是259IYADQDDPNE269，合成的抗原肽分别与KLH和BSA进行化学耦联，得到KLH耦联的C‑端抗原肽、KLH耦联的N‑端抗原肽、BSA耦联的C‑端抗原肽和BSA耦联的N‑端抗原肽。