[发明专利]一种提高蛋白质结晶成功率的方法

摘要

本发明提供了一种提高蛋白质结晶成功率的方法，包括如下步骤：将溶质、溶剂以及水按照一定顺序和比例混合均匀，配制成具有特定组分及比例的溶液，将配制好的溶液置于恒温水浴中，温度设置范围为常温至70℃，待溶液温度稳定后，将结晶板浸入配制好的表面处理溶液中，浸蚀一定时间，配制不同种类的蛋白质结晶溶液，将配制好的结晶溶液加入到表面处理过及未处理的结晶板中，在恒温培养箱中培养，观察实验结果。

主权项

一种提高蛋白质结晶成功率的方法，其特征在于包括下述步骤：（1）不同处理溶液的配制：①将重铬酸钾加入到蒸馏水中，搅拌至重铬酸钾完全溶解，然后向重铬酸钾溶液中缓慢加入浓硫酸并不断搅拌至溶液混合均匀，所得均匀溶液中各组分的质量比为：重铬酸钾：蒸馏水：浓硫酸=1：（2‑5）：（25‑40）；或者②将高锰酸钾加入到蒸馏水中，搅拌搅拌至高锰酸钾完全溶解，然后再向高锰酸钾溶液中缓慢加入浓硫酸并不断搅拌至溶液混合均匀，所得均匀溶液中各组分的质量比为：高锰酸钾：蒸馏水：铬酸酐：浓硫酸=1：（1‑5）：（3‑5）：（5‑25）；或者③将铬酸酐加入到蒸馏水中，搅拌至铬酸酐完全溶解，再向铬酸酐溶液中加入磷酸搅拌，最后再向该溶液中缓慢加入浓硫酸并不断搅拌至溶液混合均匀，所得均匀溶液中各组分的质量比为：铬酸酐：蒸馏水：磷酸：硝酸：浓硫酸=1：（3‑10）：（10‑40）：（15‑20）：（60‑120）；或者④将铬酸酐加入到蒸馏水中，搅拌至铬酸酐完全溶解，然后向铬酸酐溶液中缓慢加入浓硫酸，并不断搅拌至溶液混合均匀，混合溶液各组分的质量比为：铬酸酐：水：硝酸：浓硫酸=1：（5‑25）：（10‑15）：（30‑80）；或者⑤将重铬酸钾加入到蒸馏水中搅拌至完全溶解，向重铬酸钾溶液中加入磷酸搅拌至混合均匀，最后再向该溶液中缓慢加入浓硫酸并不断搅拌，至溶液混合均匀，所得均匀溶液中各组分的质量比为：重铬酸钾：蒸馏水：磷酸：硝酸：浓硫酸=1：（1‑10）：（10‑40）：（10‑15）：（30‑90）；或者⑥将过二硫酸钾加入到蒸馏水中，搅拌至完全溶解，再缓慢的加入浓硫酸，并不断搅拌至溶液混合均匀，所得混合溶液中各组分的质量比为：过二硫酸钾：蒸馏水：磷酸：浓硫酸=1：（10‑40）：（15‑25）：（400‑650）；或者⑦将盐酸和硝酸依次加入到蒸馏水中，搅拌至溶液混合均匀后，再缓慢加入浓硫酸，并不断搅拌至溶液混合均匀，混合溶液各组分的体积比为：盐酸：水：硝酸：浓硫酸=1：（150‑230）：（260‑300）：（520‑600）或者⑧将表面活性剂加入到蒸馏水中搅拌至完全溶解，再加入甲苯搅拌至溶液混合均匀，各组分的质量比为：表面活性剂：乙醚：甲苯：水=1：（1‑3）：（2‑5）：（10‑15）或者⑨将乙醚、丙酮和蒸馏水按照体积比1：（1‑5）：（4‑20）混合均匀，配制成处理溶液；（2）结晶板的处理：将以上配置好的溶液置于恒温水浴中，其中处理溶液①至③、 处理溶液⑤温度设置范围为常温至70℃，处理溶液④、处理溶液⑥、处理溶液⑦温度设置范围为40℃至70℃，处理溶液⑧温度设置范围为20至50℃，处理溶液⑨温度设置范围为10至40℃待溶液温度稳定后，将结晶板浸入配制好的表面处理溶液中，浸蚀一定时间；（3）蛋白质结晶：配制不同种类的蛋白质结晶溶液，将配制好的结晶溶液加入到表面处理过的结晶板中，以未处理的结晶板作为对照实验，在恒温培养箱中培养，将结晶板放置在20℃的恒温培养箱中，培养2‑6天，观察结晶结果。