[发明专利]一种玻璃表面接枝用于蛋白质结晶的方法有效
| 申请号： | 201310176188.0 | 申请日： | 2013-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN103242425A | 公开（公告）日： | 2013-08-14 |
| 发明（设计）人： | 尹大川;张辰艳;王前进;沈何放;郭云珠;何进;卢慧甍;曹慧玲;刘永明 | 申请（专利权）人： | 西北工业大学 |
| 主分类号： | C07K1/30 | 分类号： | C07K1/30;C07K14/62;C12N9/22;C12N9/50;C12N9/36;C12N9/08 |
| 代理公司： | 西北工业大学专利中心 61204 | 代理人： | 顾潮琪 |
| 地址： | 710072 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种玻璃表面接枝用于蛋白质结晶的方法，将用酒精或者丙酮超声处理后的玻璃片浸泡在浓硫酸和双氧水中；再用去离子水清洗玻璃表面至酸碱度为中性，用有机溶剂稀释的硅烷溶液浸泡后得到玻璃基底，制备蛋白质结晶溶液并滴在玻璃基底的表面上，呈液滴状，静置结晶；在显微镜下观察，统计出现蛋白质晶体的条件数目。本发明通过对结晶玻璃表面进行官能团接枝，使得蛋白质在玻璃表面浓缩，同时在该底面形成有序的结构，降低形核的表面能，从而提高了蛋白质结晶成功率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 玻璃 表面 接枝 用于 蛋白质 结晶 方法 | ||
【主权项】：
一种玻璃表面接枝用于蛋白质结晶的方法，其特征在于包括下述步骤：（a）将用酒精或者丙酮超声处理后的玻璃片浸泡在体积比为1:1～10:1的浓硫酸和双氧水中10～50h，所述的浓硫酸浓度为98%；用去离子水清洗玻璃表面至酸碱度为中性，用有机溶剂稀释50～500倍的硅烷溶液浸泡0.1～24h，然后用同样的有机溶剂清洗玻璃基底，烘干备用；（b）配置pH值在3～10，浓度范围为0.05～0.5M的缓冲液，使用缓冲液溶解蛋白质，使蛋白质溶液中蛋白质的终浓度达到5～30mg/ml；（c）将结晶试剂与蛋白质溶液按照（0.1～20）：1体积比混合，制备蛋白质结晶溶液；（d）将制备的蛋白质结晶溶液滴在玻璃基底的表面上，呈液滴状，在0～60℃下静置结晶；在显微镜下观察，统计出现蛋白质晶体的条件数目。
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