[发明专利]一种提高蛋白质结晶成功率的方法有效
申请号: | 201310185967.7 | 申请日: | 2013-05-20 |
公开(公告)号: | CN103254275A | 公开(公告)日: | 2013-08-21 |
发明(设计)人: | 尹大川;王燕;张辰艳;刘永明;卢慧甍;商澎 | 申请(专利权)人: | 西北工业大学 |
主分类号: | C07K1/30 | 分类号: | C07K1/30;C12N9/36;C12N9/08;C12N9/22;C12N9/50 |
代理公司: | 西北工业大学专利中心 61204 | 代理人: | 吕湘连 |
地址: | 710072 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高蛋白质结晶成功率的方法。该方法缓冲液溶解蛋白质、过滤除去杂质后,用不同的结晶试剂进行蛋白质结晶实验,具体将结晶试剂与蛋白质溶液按照体积比为0.1~1:1的比例混合后置于密闭的结晶板,将结晶板放置在一个安装有频率可控可闻声波发生器的密闭隔音温控箱中静置直至结晶。本发明的有益效果是:通过可闻声波刺激蛋白质晶体的生长,加速了蛋白质分子的热运动,增加了分子碰撞的概率,进而提高蛋白质晶体的形核效率,从而提高了结晶成功率。通过本发明,可使蛋白质结晶成功率由过去的4-10%提高至12-40%。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 蛋白质 结晶 成功率 方法 | ||
【主权项】:
一种通过可闻声波来提高蛋白质结晶成功率的方法,包括如下步骤:步骤一:缓冲液溶解蛋白质,使蛋白质的终浓度达到1~40mg/ml,用孔径范围为0.01~1μm的滤膜过滤除去杂质;步骤二:用不同的结晶试剂进行蛋白质结晶实验,具体将结晶试剂与蛋白质溶液按照体积比为0.1~1:1的比例混合后置于密闭的结晶板,将结晶板放置在一个安装有频率可控可闻声波发生器的密闭隔音温控箱中静置直至结晶,该温控箱的温度范围为0~30℃,可闻声波频率范围在20Hz到20000Hz之间;步骤三:上述结晶体系在密闭隔音温控箱中放置4~1440小时后取出,在显微镜下观察,统计出现蛋白质晶体的条件数目。
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