[发明专利]用于布鲁杆菌环介导等温扩增的引物及检测反应体系

摘要

本发明公开了一种用于布鲁杆菌环介导等温扩增的引物及检测反应体系，针对布鲁杆菌保守的OMP25蛋白基因设计了4条LAMP的特异性引物，通过优化反应条件，建立了布鲁杆菌的LAMP快速检测方法。特异性和敏感性试验结果显示，该方法能够特异地检测布鲁杆菌，其最低检测限为5copies/μL。扩增产物可通过琼脂糖凝胶电泳、显色反应进行判定。LAMP可以快速、直观、准确地检测布鲁杆菌，是一种适合基层现场应用的检测方法。

主权项

一种用于布鲁杆菌环介导等温扩增的引物，其特征在于，包含扩增布鲁杆菌保守基因omp25特异碱基序列的正向内引物FIP、正向外引物F3、反向内引物BIP、反向外引物B3，序列如下：外引物：F3     5’‑ATTGCCGGTTCGCAGATC‑3’B3     5’‑GCGGAAATCCTGCGTGTC‑3’内引物：FIP    5’‑TCAGCTTGGCTTCGAGACCGCTTAACAACGGCTTGGACGA‑3’BIP    5’‑GGCCGCGTTGAGTACCGTTAAGCTTGTTGCGAACAGTCG‑3’所述引物与基因omp25的412‑618bp位的核酸序列的一部分或其互补链互补。