[发明专利]提取粪便中蛋白的方法有效
申请号: | 201310189360.6 | 申请日: | 2013-05-21 |
公开(公告)号: | CN103267669A | 公开(公告)日: | 2013-08-28 |
发明(设计)人: | 蔡元坤;王会鹏 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属上海市第五人民医院 |
主分类号: | G01N1/42 | 分类号: | G01N1/42 |
代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 曹翠娟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种提取粪便中蛋白的方法,包括以下步骤:取柱状粪便,将其分为三段,选择中段去皮,采集粪便样本装入特质盒中,置入冰中保存;然后将粪便样本转至-80℃冰箱中保存,待用;精确称取粪便样本置入离心管中,加入RIPA裂解液,用涡旋机涡旋样品,然后进行冰水浴,重复涡旋、冰水浴步骤,直至样品中无肉眼可见粪便颗粒;将涡旋液冰水浴后4℃离心,取上清液,将上清液再次离心,最终的上清液置于-80℃冰箱中保存。本发明方法每个步骤都包含了冰浴,减少了蛋白质降解的可能,同时也使蛋白充分解离,蛋白产量较高;本发明提取蛋白方法的重现性好、精密度高,而且离心时间较长,保证了蛋白的纯度,操作方便,较易控制。 | ||
搜索关键词: | 提取 粪便 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种提取粪便中蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取柱状粪便,将其分为三段,选择中段去皮,采集粪便样本装入特质盒中,置入冰中保存;(2)然后将粪便样本转至-80℃冰箱中保存,待用;(3)精确称取粪便样本置入离心管中,加入RIPA裂解液,用涡旋机涡旋样品,然后进行冰水浴,重复涡旋、冰水浴步骤,直至样品中无肉眼可见粪便颗粒;(4)将涡旋液冰水浴后4℃离心,取上清液,将上清液再次离心,最终的上清液置于-80℃冰箱中保存。
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