[发明专利]熊果酸作为免疫佐剂疫苗的制备方法和用途

摘要

本发明涉及一种熊果酸作为免疫佐剂疫苗的制备方法和用途，该方法是将熊果酸和H22细胞共培养，采用常规方法制备肝癌细胞疫苗，免疫小鼠后建立肝癌模型，结果表明熊果酸为佐剂的疫苗免疫小鼠后，荷瘤小鼠肿瘤的生长明显抑制，小鼠的生命延长率明显高于模型组，胸腺等免疫器官得到保护，脾淋巴细胞增殖能力显著升高，血清中细胞因子IL-2、IL-4含量明显升高，CD4+/CD8+T细胞含量比例明显升高，免疫荧光显示免疫小鼠血清可与H22细胞发生特异性结合，ELISA从血清中检测到高滴度抗体。熊果酸作为佐剂制备的肝肿瘤全细胞疫苗，可有效的提高肝肿瘤疫苗的免疫原性，通过该方法获得的熊果酸免疫佐剂疫苗安全，无毒，来源广泛，克服了目前免疫佐剂单一，免疫效果低，副作用难以避免的问题。

主权项

一种熊果酸作为免疫佐剂疫苗的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、在对数生长期H22肿瘤细胞5×107个接种于1ml含灭活的10%胎牛血清的RPMI1640培养液中，加入20μmol/mL的熊果酸培养48h；b、离心弃上清液，剩余物细胞悬浮于1ml生理盐水中，再放入液氮中冷冻，时间5‑10分钟，再将冷冻物取出，放入温度37℃水融化，反复5‑8次，即可得到熊果酸免疫佐剂疫苗。