[发明专利]一种从赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法

摘要

本发明公开了一种从赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法，包括：1)活化菌株；2)初级培养；3)次级培养；4)减压抽滤得到菌丝体，菌丝体恒温干燥；5)研磨，过筛；6)多次进行200~300目硅胶柱层析，得到的流分无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后所得黄色产物，用氯仿-甲醇(V∶V＝1∶1)重结晶，得到白色固体，经HR、EI-MS、NMR、HMBC、NOESY、HSQC谱图分析证明白僵菌交酯Ⅰ首次在该菌种代谢物中提取到。

主权项

一种从赭色小莫勒菌中提取白僵菌交酯Ⅰ的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）将赭色小莫勒菌活化后，取菌块接种到PDB培养基中，在160r/min、25℃条件下连续培养7天即初级培养，按10％接种量再次转接到PDB培养基中，继续在160r/min、25℃条件下连续培养28天即次级培养；2）减压抽滤得到菌丝体，菌丝体在40℃下恒温干燥后研磨成粉状，过筛，用乙酸乙酯浸泡，超声，重复3次，合并浸泡液，旋蒸得菌丝体浸膏；3）将菌丝体浸膏上200~300目硅胶柱，进行粗分，先用石油醚洗脱，之后换石油醚：二氯甲烷体积比=5:1洗脱，收集该部位洗脱液，旋蒸浓缩；4）将步骤3）中得到的浓缩物继续上200~300目硅胶柱，以石油醚：丙酮体积比=20:1梯度洗脱，收集石油醚：丙酮体积比=10:1部位洗脱液，旋蒸浓缩；5）将步骤4）中得到的浓缩物进一步上200~300目硅胶柱，先以石油醚洗脱，之后换石油醚：丙酮体积比=8：1梯度洗脱，最后以乙酸乙酯：丙酮体积比=5:1梯度洗脱，收集乙酸乙酯：丙酮体积比=1:1部位洗脱液，旋蒸浓缩，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后所得黄色产物，用氯仿：甲醇体积比＝1∶1重结晶，得到白色固体。