[发明专利]基于随机引物条码技术建立分析免疫库谱的方法无效
申请号: | 201310230809.9 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN103436523A | 公开(公告)日: | 2013-12-11 |
发明(设计)人: | 尚小云;吴玉章;董惠;王昊亮 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人: | 周维锋 |
地址: | 400038 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明针对医药生物技术,涉及基于引物条码技术的高通量测序方法及其用于免疫基因组学中的研究,具体为基于cDNA分子的标记方法的T细胞受体高通量测序方法,具体包括以下步骤:提取样本中的RNA,对RNA进行逆转录,得cDNA,根据所得cDNA设计特异性引物,设计的特异性引物的下游引物、随机条码和测序接头以串联的方式组成随机引物条码,将所得随机引物条码过量加入所得cDNA分子中,利用随机引物条码中的测序接头进行高通量测序,测序数据进行VDJ比对,分析CDR3序列,建立免疫库谱;本方法降低了PCR扩增过程中发生偏斜和误差的方法,该方法根据特定的引物条码对应的给定的cDNA序列,使得cDNA分子的数量可以量化。 | ||
搜索关键词: | 基于 随机 引物 条码 技术 建立 分析 免疫 方法 | ||
【主权项】:
cDNA分子的标记方法,其特征在于:在cDNA两端加入过量的随机引物条码,使cDNA分子两端各标记对应的随机引物条码。
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