[发明专利]一种血液DNA的快速提取方法

摘要

本发明公开一种血液DNA的快速提取方法。现有技术很繁琐而且耗时，且过去传统的方法抽提出的痕量DNA由于含量太少，很难用来进行分子诊断。本发明能够在很短时间内快速完成血液样本的DNA提取。采集来的全血样本首先加入细胞洗涤液，离心分离后得到残留细胞团，加入SDS、醋酸铵、盐酸胍、蛋白酶K置于60℃水浴15～30分钟，然后经纯化柱充分结合DNA，离心取沉淀物加入硅胶膜洗涤液洗涤两次，离心后加入TE缓冲液，最后得到含DNA的保存液。本发明具有较高的重复稳定性、较简单且不耗时、所得DNA质量高的优点。

主权项

一种血液DNA的快速提取方法，其特征在于该方法包括以下步骤：步骤(1).细胞裂解分离：在全血样本中加入细胞洗涤液，其中全血样本与细胞洗涤液的体积比为5：14，颠倒混匀样本，常温孵育5～10min，常温下13000～16000g转速离心1分钟，弃上清，得到残留细胞团；步骤(2).消化沉淀：取20～30ul上述步骤(1)所得的残留细胞团，然后依次加入15ul体积分数为10﹪的十二烷基硫酸钠SDS、15ul浓度为8M的醋酸铵、600ul浓度为5M的盐酸胍、3ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K，60℃水浴15～30分钟后，冰浴冷却至常温，然后在4～8℃下13000～16000rpm/min转速离心2～3min，得到离心后的上清液，该上清液为DNA抽提液；步骤(3).纯化：将上述步骤(2)所得的DNA抽提液加入到2ml Eppendorf管中的纯化柱中，常温孵化2～5分钟，充分结合DNA，经纯化柱吸附后，离心分离，得到沉淀物；将沉淀物经硅胶膜洗涤液洗涤两次，离心分离，去除纯化柱中残存的硅胶膜洗涤液，得到洗涤后的沉淀物；然后再洗涤后的沉淀物中加入TE缓冲液，溶解洗脱DNA后，离心分离，去除沉淀，得到含DNA的保存液。