[发明专利]一种编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用有效

专利信息
申请号: 201310235337.6 申请日: 2013-06-14
公开(公告)号: CN103275998A 公开(公告)日: 2013-09-04
发明(设计)人: 李玮;张金秀;王立安;李天云;陈娇娇;鞠建松;薛张伟;张琳琳;张庆 申请(专利权)人: 河北博伦特药业有限公司;河北师范大学
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N9/02;C12N15/70;C12P13/24;C12R1/19
代理公司: 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 代理人: 张素静
地址: 052260 河*** 国省代码: 河北;13
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摘要: 发明公开了一种具有编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用,对指孢囊菌(Dactylosporangiumsp.RH1)中反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶(GenBankID:BAA20094.1)基因密码子进行优化获得p4hyd基因,对优化后p4hyd基因进行截短,获得P4Hyd1-257基因,分别构建重组质粒pET-M-3C-P4Hyd和pET-M-3C-P4Hyd1-257,通过大肠杆菌进行原核表达,以菌体作酶源转化生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。实验结果表明,以L-脯氨酸为底物,相比于pET-M-3C-P4Hyd,pET-M-3C-P4Hyd1-257转化生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的最高转化率由91.4%提高到97.4%,转化反应时间由80小时缩短到60小时,转化率得到明显提高,转化时间明显缩短。本发明可用于生物转化法生产L-羟脯氨酸,具有较好的工业应用前景。
搜索关键词: 一种 编码 活性 反式 羟基 脯氨酸 羟化酶 基因 片段 及其 应用
【主权项】:
一种具有编码高活性反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸羟化酶的基因片段,其特征在于核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
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