[发明专利]在Pichia pastoris中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法有效
| 申请号： | 201310244829.1 | 申请日： | 2013-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN103333912A | 公开（公告）日： | 2013-10-02 |
| 发明（设计）人： | 王建华;张勇;滕达;王秀敏;毛若雨 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院饲料研究所 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;C12P21/02;C07K14/39 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达菌丝霉素衍生物MP1102的方法。本发明利用GAP启动子替换载体pPICMP1102中的AOX启动子，构建组成型重组表达载体pGAPMP1102并转化毕赤酵母X-33，获得的重组酵母经发酵培养，能够分泌产生MP1102。本发明首次实现菌丝霉素衍生物MP1102在毕赤酵母中组成型表达，经120小时培养后发酵液中总蛋白浓度达到387.6mg/L；发酵液上清经G25脱盐和SP离子交换层析后能够得到目标产物纯品，产量为105.84mg/L；经Genetools分析其纯度为95.13%。抑菌实验表明MP1102对金黄色葡萄球菌ATCC标准菌株有很强抑制作用，MP1102的MIC介于0.0028-0.11μM。本发明所述方法获得的MP1102可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域，具有广阔的应用价值和市场前景。 | ||
| 搜索关键词： | pichia pastoris 组成 表达 菌丝 霉素 衍生物 mp1102 方法 | ||
【主权项】：
一种表达载体，其特征在于，含有毕赤酵母组成型启动子GAP、位于启动子下游的编码信号肽的核苷酸序列、编码菌丝霉素衍生物MP1102的基因序列和TAA，TAG终止子序列，所述编码MP1102的DNA序列5’端具有酵母Kex2切割识别序列AAGAGA。
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