[发明专利]用于肿瘤MRI/CT双模诊断的凝集素-铁核金壳纳米粒子合成方法

摘要

一种用于肿瘤MRI/CT双模诊断的凝集素-铁核金壳纳米粒子合成方法，属于医疗诊断器械技术领域，其方法是：a、将二氯化铁与三氯化铁以FeⅡ/FeⅢ摩尔比为0.5的浓度的溶液按照1:10的体积比将上述铁盐溶液逐滴加入到1.5MNaOH溶液中剧烈搅拌，产生的黑色沉淀用磁铁收集，水洗、收集，用四甲基氢氧化铵冲洗后溶解沉淀；得到的三氧化二铁纳米粒子溶液用水稀释至1.1mM，添加柠檬酸钠搅拌，依次添加盐酸羟铵和氯金酸交替进行；得到金包三氧化二铁核壳结构纳米粒子；b、将凝集素与NHS-PEG-S-S-PEG-NHS，将上述PEG与K2CO3溶液中反应至少4h，将Fe2O3@Au纳米粒子与PEG-SH5000继续反应1h以上。有益效果是：粒子粒径小，合成方法简单，稳定性好，血流循环时间长，无免疫原性，可针对不同的肿瘤细胞筛选出可以特异性结合的凝集素靶向分子。

主权项

一种用于肿瘤MRI/CT双模诊断的凝集素‑铁核金壳纳米粒子合成方法，其方法是：a、将二氯化铁与三氯化铁以FeⅡ/FeⅢ摩尔比为0.5的浓度的溶液按照1:10的体积比将上述铁盐溶液逐滴加入到1.5M NaOH溶液中剧烈搅拌，产生的黑色沉淀用磁铁收集，用水洗三次，用0.01M盐酸中和沉淀中的负离子，再用磁铁收集，用水洗三次，得到新鲜的四氧化三铁纳米粒子，将其溶解在0.01M硝酸溶液中，在90‑100℃加热并剧烈搅拌数小时直至完全氧化成棕红色的γ‑Fe2O3，待溶液冷却至室温，离心收集，用水冲洗，用0.1M四甲基氢氧化铵冲洗一次后溶解沉淀；将所得到的三氧化二铁纳米粒子溶液用水稀释至1.1mM，添加0.1M柠檬酸钠搅拌10min以上，依次添加0.2M的盐酸羟铵和1%的氯金酸交替进行4次；得到金包三氧化二铁核壳结构纳米粒子；b、将用10 mmol/L HEPES，137 mmol/L NaCl，pH 7.5的HEPES缓冲溶液配制的凝集素与4,7,10,13, 16,19,22, 25,32,35, 38,41,44, 47, 50, 53‑hexadecaoxa‑28, 29‑dithiahexapentacontan edioic acid di‑N‑succinimidyl ester，MW = 1109.26，0.05 mg/mL 溶于无水DMSO 的NHS‑PEG‑S‑S‑PEG‑NHS以2:1摩尔比，于室温下反应12h以上；然后，将上述PEG二硫化物修饰的凝集素与0.4 nmol/L 的Fe2O3@Au纳米粒子溶液以300:1摩尔比在1.8 mmol/L 的K2CO3 溶液中反应至少4 h；最后，将凝集素修饰的Fe2O3@Au纳米粒子与O‑[2‑(3‑ mercaptopropio nylamino) ethylmerca ptoethyl]‑O’‑methylpolyethyleneglycol, MW = 5000的PEG‑SH5000以1:10000摩尔比继续反应1 h以上，并通过反复离心除去未反应的配体，再分散于水中4 ℃下保存备用；合成凝集素修饰的Fe2O3@Au统称为Lectin‑ Fe2O3@Au。