[发明专利]一株黄曲霉生防菌的抗菌活性物质及其分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种抗菌活性物质，来自于萎缩芽孢杆菌，来源于下述制备方法将萎缩芽孢杆菌接种至营养肉汤培养基上进行摇床培养，将培养后的发酵液离心收集上清液，将所得上清液用过滤器过滤，即为包含抗菌活性物质的去菌体发酵上清液。进一步的，本发明还公开了所述抗菌活性物质的培养、分离纯化的方法。

主权项

一株黄曲霉生防菌的抗菌活性物质的制备方法，其特征在于包括下述步骤：1)将萎缩芽孢杆菌菌种接种至营养肉汤培养基，摇床培养即得发酵液；2)将发酵液低温下高速离心，收集上清液，用0.45μm微型过滤器过滤，即为包含抗菌活性物质的去菌体发酵上清液；3)将包含抗菌活性物质的去菌体发酵上清液进行粗提，粗提方法为硫酸铵沉淀法，将发酵上清液加入硫酸铵固体粉末至80％饱和度硫酸铵，离心收集沉淀；4)包含抗菌活性物质的粗提物进行层析分离纯化，包括脱盐得到富集包含抗菌活性物质的洗脱液和将脱盐所得洗脱液进行离子交换层析将所得流出液收集、合并，浓缩得到萎缩芽孢杆菌抗菌活性物质纯化物的步骤；所述步骤1)的培养条件为接种量：1.5％；营养肉汤培养基装液量：30mL/250mL；营养肉汤培养基初始pH值：7.0；培养温度：35℃；培养时间：48h；培养所用摇床转速：180r/min；步骤4)中采用Sephadex G‑25脱盐，采用DEAE Sepharose Fast Flow进行离子交换层析。