[发明专利]一种处理橡胶废气菌种的筛选分离方法

摘要

一种处理橡胶废气菌种的筛选分离方法，涉及微生物菌株筛选技术领域。筛选步骤包括样品采集、增菌培养、驯化培养、菌种纯化和鉴定菌种，在驯化过程中采用固体、液体交替驯化，能够高效快速、定向分离出废气处理的菌种，分离出的菌种在处理大气量、低浓度轮胎厂废气具有显著的除臭效果，设备投入少。

主权项

一种处理橡胶废气菌种的筛选分离方法，其特征在于：包括以下步骤，（1）样品采集：用无菌取样瓶采集橡胶生产厂的底泥，放入恒温箱中待用，温度为25℃~35℃；（2）增菌培养：在好氧条件下，向底泥中加入10g/L的葡萄糖进行恒稳培养，温度为25℃~35℃，培养时间为2~3天；（3）驯化培养：取底泥分装到装有液体富集培养基的锥形瓶中，然后分别加入甲苯、二甲苯，甲苯、二甲苯的加入量为10mL/L~12 mL/L，在25℃~35℃温度下摇床恒温培养驯化，培养是将为3~5天；在驯化的培养液中用接种环提取培养液，接种到固体富集培养基中培养，培养2~3天后，将固体富集培养基上长出的细菌采用影印法将其接种到以甲苯、二甲苯、甲苯和二甲苯的混合为唯一碳源的固体选择培养基上培养，培养3~5天后观察其菌落，挑取不同形态的单菌落在液体选择培养基上培养，再次进行驯化，按上述驯化方法，连续驯化2~3次后接种到固体富集培养基上；（4）菌种纯化：在驯化好的固体富集培养基上挑取不同形态的单菌落在固体富集培养基上划线纯化，培养温度为25℃~35℃，培养时间2~3天，然后将纯化菌落接至分别以甲苯、二甲苯、甲苯和二甲苯混合为唯一碳源的固体选择培养基内进行恒温培养，培养温度为25℃~35℃，培养时间3~5天，不断地进行选择、富集培养，最终将纯化的菌落移接到斜面培养基中，从所分离的可以处理橡胶废气的菌种中，把其中的每一个菌种都采用相同的方法，平行接种于含有废气的固体培养基中，如果平行接种的菌落都能在废气中存活并处理废气，则为可选用的菌种之一，否则淘汰；（5）鉴定菌种：用MIDI脂肪酸鉴定系统提供的萃取、鉴定方法鉴定纯化出的菌落。