[发明专利]一种茄子黄萎病抗性的快速鉴定方法

摘要

本发明提供一种茄子黄萎病抗性的快速鉴定方法。该方法包括茄子种子催芽、播种与幼苗培育、黄萎病孢子悬浮液的制备、病原菌侵染处理、发病调查等步骤。本发明采用菌液浸泡侵染幼苗根系的方式使茄子幼苗感染黄萎病菌，将茄子幼苗先统一在育苗基质中培养至二叶一心再侵染，所以茄子幼苗的长势、大小易于控制，保证了鉴定结果的一致性和可靠性；本发明采取了合适的黄萎病孢子的培养基、调整了黄萎病孢子悬浮液的浓度，因此侵染效果较好，侵染苗存活率高、接菌均匀，发病迅速；本发明只要将长势一致的不同植株伤根后浸泡在菌液中即可，所以操作简便、育苗时间短，尤其适合大批量的茄子育种材料的黄萎病抗性鉴定。

主权项

一种茄子黄萎病抗性的快速鉴定方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：A、茄子种子催芽：选择茄子种质资源作为鉴定对象；挑选茄子种质资源的籽粒饱满的种子，进行50℃、30分钟温汤浸种，再将种子放在铺好吸水纸的培养皿中，最后30℃恒温处理，直至得到萌发的种子；B、播种与幼苗培育：将萌发的种子播种于育苗培养基质，进行培养，得到两叶一心的幼苗；C、黄萎病孢子悬浮液的制备：a.选择田间典型病株，将茄子植株病原菌可能较密集的部位进行分割；b.将上述病原菌可能较密集的部位进行消毒处理，得到消毒处理后的部位； c.将消毒处理后的部位进行解剖，得到髓部组织，再将述髓部组织切成0.5cm小段，并接入PDA平板培养基中；d. 当接种后的PDA平板培养基的表面植物组织周围长出白色菌落后，将该白色菌落转入PDA 斜面培养基中保存备用；e. 从转入白色菌落的PDA斜面培养基中取黄萎菌，转入PDA平板培养基中，进行27℃恒温培养2‑3周，得到培养好的黄萎菌菌块；f. 将培养好的黄萎菌菌块于无菌水中进行振荡、过滤，利用血球计数板调整孢子浓度，得到黄萎菌孢子悬浮液；D、病原菌侵染处理：a.将两叶一心的幼苗从所述育苗培养基质中拔出，进行清洗处理，再进行伤根处理，得到伤根后的幼苗；b.将伤根后的幼苗进行侵染处理，得到侵染苗；E、发病调查：分别于侵染处理后的5天、10天、15天、20天，调查所述侵染苗的发病状况，根据茄子黄萎病病情分级标准确定0、1、2、3、4共5个发病等级，再根据该发病等级计算病情指数，再根据该病情指数判断所述茄子种质资源的茄子黄萎病抗性分级。