[发明专利]一种低温中性纤维素酶的制备及复配方法

摘要

一种低温中性纤维素酶的制备方法，所述低温中性纤维素酶以里氏木霉为菌株制备，该制备方法包括：活化菌种，紫外诱变，然后在低温下培养、纯化，并将纯化菌株于10～15℃下发酵制备种子液，将种子液接种于产酶培养基中，10～15℃下培养96～144小时，便获得低温中性纤维素酶；本发明还提供了一种所述低温中性纤维素酶的复配方法。本发明的有益效果为：操作简单，发酵周期短，可降低酶的应用温度，从而降低工业应用的耗能，使其更环保，具有广阔的应用前景；此外，本发明还提供了一种该纤维素酶的复配方法，其可广泛用于造纸纤维的改性，降低造纸工业纤维改性的成本。

主权项

一种低温中性纤维素酶的制备方法，其特征在于：选用里氏木霉制备所述的低温中性纤维素酶，所述制备方法包括以下步骤：(1)将里氏木霉菌株接种到斜面活化培养基上，活化菌种；培养活化后的菌种，挑取单菌落制备孢子悬浮液，并用紫外照射孢子悬浮液，诱变得到孢子菌落；(2)将(1)中的孢子菌落涂布于初筛培养基中，在10～15℃下培养3～5天，挑选初筛菌株并纯化该菌株；(3)在10～15℃下，将(2)中的纯化菌株按5％的接种量接种于发酵培养基中，逐级扩大培养制备种子液，培养时间为48～72小时；(4)将(3)中的种子液按发酵液体积3～5％的接种量接种于产酶培养基中，10～15℃培养96～144小时，即里氏木霉发酵生产低温中性纤维素酶结束；将发酵液在4000～6000rpm离心，收集所得液体为粗酶液；(5)将(4)得到的粗酶液进行超浓缩过滤，得到1000～2000UI/G的浓缩酶液。