[发明专利]一种用于大规模、高通量基因分型的贝类DNA快速提取方法

摘要

本发明提供了一种用于大规模、高通量基因分型的贝类DNA快速提取方法，首先选取少量鳃丝组织作为取样组织，然后进行蛋白消化裂解细胞释放DNA，仅需离心吸取上清弃除沉淀，上清溶液稀释后即可用于后续分子标记分型工作，省略了常规DNA提取方法的蛋白抽提和DNA沉淀等过程，其整个流程可在一小时内完成，具有操作快速简单、提取的DNA质量高且保质期长等优点，可用于SNP等常见分子标记的准确分型；而且仅取用贝类的一两根鳃丝，对贝类生存、生长、发育等影响很小，适用于对大量样本或是珍贵样本的研究工作，是一种优良的适用于贝类的快速有效非致死性的DNA的提取方法。

主权项

一种用于大规模、高通量基因分型的贝类DNA快速提取方法，其特征在于它包括以下步骤： （1）、剪取贝类的鳃丝组织为取样组织；（2）、向剪取的鳃丝组织中加入细胞裂解液，使鳃丝悬浮于所述细胞裂解液中，每毫克鳃丝组织加入100ul裂解液，所述细胞裂解液的组分为：100 mM NaCl、10 mM Tris‑HCl和1 mM EDTA，所述细胞裂解液的pH 为8.0；再向所述细胞裂解液中添加蛋白酶K和SDS，使蛋白酶K浓度为0.3 mg/mL，所述SDS的质量体积比为0.50%； （3）、将步骤（2）得到的混合液置于37‑56℃水浴中消化至裂解液变澄清，消化过程中颠倒混匀使细胞充分裂解；（4）、将步骤（3）得到的混合液置于沸水浴中煮沸以灭活所述蛋白酶K；（5）、待步骤（4）的溶液冷却后，离心，吸取上清液即DNA溶液，将DNA溶液稀释后即可用于基因分型工作。