[发明专利]一种耐盐玉米自交系的简易筛选方法

摘要

耐盐玉米自交系的简易筛选方法，萌发期和幼苗期试验均在0mmol/L和180mmol/L条件下进行。在萌发期的胁迫试验中，每天补一次15mL的盐溶液，待种子萌发处理4d后，统计每个自交系发芽种子数，计算16个自交系的发芽势；7d后测定16个玉米自交系的发芽率、芽长、根长、芽鲜重和根鲜重。在苗期试验中，每隔1d补加1次50mL的去离子水，每3d补加一次对应浓度的NaC1溶液50mL，胁迫处理大约10d后，待对照叶片生长到三叶一心时，取第2片叶，测定MDA的含量、相对电导率、相对含水量。本发明通过萌发和苗期试验多个指标的测定，计算各个指标的盐害指数，依据耐盐指数对各个自交系的耐盐性进行聚类分析，并对各个自交系进行综合评价，最终筛选出耐盐自交系。其操作简便，在实验室即能完成，大幅度减少了工作量，缩短筛选时间，提高筛选效率和结果的准确性。

主权项

一种耐盐玉米自交系的简易筛选方法，其特征在于包括如下步骤：（1）收集材料：收集各地的玉米自交系样本16份； （2）种子清选与消毒：在每个玉米自交系样本中选择饱满、无破损的种子360粒；分别用0.5%的次氯酸钠消毒10 min，用蒸馏水冲洗3次，用滤纸吸干附着水，得16份玉米自交系消毒种子；  （3）盐胁迫下浸种：将16份玉米自交系消毒种子分别浸泡在0mmol/L与180 mmol/L的NaCl溶液中12 h，得16份玉米自交系盐胁迫种子分别进入步骤（4）与步骤（5），0mmol/L的作为对照样品；（4）种子萌发试验：将步骤（3）所得的16份玉米自交系盐胁迫种子分别置于直径为12 cm的培养皿中，双层滤纸作发芽床，每皿30粒，分别加入0 mmol/L与180 mmol/L的NaC1溶液，实验设3次重复；培养皿置于培养箱中25℃暗萌发；萌发期间每天补一次15 mL对应浓度的盐溶液，待种子萌发处理4 d后，统计每个自交系发芽种子数，分别计算16个自交系的发芽势；7 d后测定每个自交系的发芽率、根长、芽长、根鲜重与芽鲜重；（5）幼苗生长试验：将0 mmol/L与180 mmol/L的NaC1溶液各100 mL分别与500 g已灭菌的蛭石搅拌均匀，而后分装于15 cm×13 cm的营养钵中；将步骤（3）所得的16份玉米自交系盐胁迫种子，分别播在各自对应盐浓度的消毒蛭石中，每钵30粒，进行胁迫处理，实验设3次重复；播种后置于植物生长室中培养，生长室的昼夜温度为25±2℃/20±2℃，每天光照12 h，光照强度为600 μmol/(s·m2)，相对湿度60‑80%，期间，每隔1 d补加1次50 mL的去离子水，每3 d补加一次对应浓度的NaC1溶液50 mL，胁迫处理大约10 d后、待对照样品的叶片生长到三叶一心时，取第2片叶测定MDA含量、相对电导率与相对含水量；（6）耐盐性综合评价：采用Excel2007和SPSS19.0软件对发芽势、发芽率、芽长、根长、芽鲜重、根鲜重、MDA含量、相对电导率、相对含水量9项指标进行分析处理，并计算各个指标的耐盐指数；根据各个指标的耐盐指数对16份玉米自交系运用欧氏距离的最短距离法进行聚类分析；并依据聚类分析的结果对16份玉米自交系的耐盐性做出综合性的评价。