[发明专利]制备HBV持续感染动物模型的试剂和方法有效
| 申请号： | 201310280198.9 | 申请日： | 2013-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN104278055B | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 邓强;蓝柯;谢幼华;汪垣;齐治华;李改云 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海巴斯德研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/51;C12N15/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及制备HBV持续感染动物模型的试剂和方法。本发明构建了可有条件地在小鼠肝脏诱导乙型肝炎病毒共价、闭合、环状DNA分子(cccDNA)的构建物，并成功建立一种HBV持续感染动物模型。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 hbv 持续 感染 动物 模型 试剂 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于形成重组的乙型肝炎病毒共价、闭合、环状DNA分子的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)提供一种构建物，所述构建物包括乙型肝炎病毒基因组序列SEQ ID NO:1，该乙型肝炎病毒基因组序列中插入一段外源的内含子序列，该内含子序列包括5’端拼接供体序列、3’端分枝点信号序列及拼接受体序列；并且，在5’端拼接供体序列与3’端分枝点信号序列及拼接受体之间，按照5’→3’依次包括质粒复制序列、抗性筛选基因序列和真核基因加尾信号序列，所述的质粒复制序列、抗性筛选基因序列和真核基因加尾信号序列两端设置位点特异性重组元件；所述的内含子序列插入于乙型肝炎病毒基因组nt202‑203之间或nt2765‑2766之间；(2)将(1)的构建物转染肝细胞，诱导所述的位点特异性重组元件以敲除所述的质粒复制序列、抗性筛选基因序列和真核基因加尾信号序列，从而在肝细胞内形成重组的乙型肝炎病毒共价、闭合、环状DNA分子。
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