[发明专利]一种高效提取用于PCR扩增的地下水微生物DNA的方法有效
申请号: | 201310288695.3 | 申请日: | 2013-07-11 |
公开(公告)号: | CN103333883A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 张雪峰;郑春丽;王建英;杨彪;姚卫华;高晓玲;林忠;吕保义 | 申请(专利权)人: | 内蒙古科技大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 蒋常雪 |
地址: | 014010 内蒙*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | 本发明公开了一种高效提取用于PCR扩增的地下水微生物DNA的方法,该方法的步骤为:第一步收集地下水微生物,用无菌微孔滤膜收集微生物,再用含有十六烷基三甲基溴化铵的缓冲液将微生物洗脱下来制得微生物细胞液;第二步裂解地下水微生物细胞,向微生物细胞液中加入溶菌酶和蛋白酶K进行细胞裂解,温水水浴后离心,得到细胞裂解上清液;第三步纯化细胞裂解液,将细胞裂解上清液进行多次离心纯化后,得到粗提DNA溶液;第四步纯化微生物基因组DNA,将粗提DNA溶液进行离心纯化、用体积浓度为70%的乙醇抽提后得到纯化的微生物基因组DNA。本发明方法能够高效提取出高质量的地下水微生物基因组DNA,操作简单,提取纯度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 提取 用于 pcr 扩增 地下水 微生物 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种高效提取用于PCR扩增的地下水微生物DNA的方法,其特征在于,该方法包括收集地下水微生物、裂解地下水微生物细胞、纯化细胞裂解液和提取纯化微生物基因组DNA步骤。
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