[发明专利]一种快速提取瓜类基因组DNA的方法

摘要

本发明公开了一种快速提取瓜类基因组DNA的方法，特别是一种利用NaOH和异丙醇快速、简便的大规模提取瓜类植物组织基因组DNA的方法。其利用96孔PCR扩增板在传统碱煮法提取后，使用异丙醇对提取产物进行沉淀提纯，大幅度提高了瓜类基因组DNA的提取质量、提取速度及提取规模，满足了后续进行的瓜类作物育种改良、品种纯度分子标记鉴定等相关项目对瓜类基因组DNA的需要；同时，本方法工艺步骤简单、易于操作且组织需求小，特别适合对瓜类基因组DNA大批量的提取。

主权项

一种快速提取瓜类基因组DNA的方法，其特征在于按下述步骤依次操作：（1）瓜类植物组织选取：选取2‑2.5mm3瓜类植物的幼嫩部位组织；（2）基因组DNA的提取：将选取的瓜类植物组织放置于96孔PCR板的底部，碱煮法提取基因组DNA；（3）基因组DNA的沉淀：将碱煮后的96孔PCR板置于离心机进行离心后，依次提取其每孔内的上清液并移至另外一个96孔PCR板的各孔内，各孔内再加入50‑100μL的异丙醇，置于‑20℃冰箱内冰冻保存；（4）基因组DNA的重溶：将步骤（3）沉淀基因组DNA的96孔PCR板置于离心机进行离心后，吸出每孔内的上清液舍弃；沉淀加入75%乙醇40μL，静置2min，吸出乙醇舍弃；沉淀加入95%乙醇40μL，静置2min，吸出乙醇舍弃；将96孔PCR板倒置于桌面30min，加入100μL的TE缓冲液，即得纯化基因组DNA。