[发明专利]一种新型非酒精性脂肪肝病模型制备方法

摘要

本发明公开了一种新型非酒精性脂肪肝病模型制备方法，包括以下步骤：a.将饲养小鼠随机分两组，第一组：模型小组：第二组：对照小鼠；每天记录状态并取尿液、肝组织及血液作脂质分析；b.处理实验对象；c.建立模型；d.肝组织与血液采集；e.将鼠肝组织标本进行常规冰冻切片，取材、普通胶水包冰冻切片、染色后封片；e.对模型小鼠常规进行病理检查；f.对对照小鼠常规进行病理检查；将f）和g）步骤中得出的动态分析肝组织脂肪进行对比。本发明建立的新型非酒精性脂肪肝病模型，路线合理，易操作，且针对性强，是进一步研究非酒精性脂肪肝的有效工具。

主权项

一种新型非酒精性脂肪肝病模型制备方法，其特征在于：包括以下步骤：饲养小鼠分组用雄性4～6周龄野生型(小鼠，在洁净环境中饲养；随机分两组，第一组：模型小组：第二组：对照小鼠；每天记录体重、活动状态、留取尿液、留取肝组织作病理学检查和脂质分析，留取血液作脂质分析处理实验对象：以正常两组小鼠；建立模型：对模型小鼠采用腹腔经拮抗体内运送长链脂肪酸进入线粒氧化的载体‑‑‑‑‑‑‑肉毒碱；肝组织与血液采集：分别将两组小鼠放在密封容器内，加入乙醚溶液，在小鼠不活动时，将其四肢及头固定在平板上，酒精消毒腹部，迅速剖腹，从鼠心采血后，取出肝组织，切成大小为1. 5 cm ×1. 5 cm ×0. 3 cm组织块，分别放在AAF混合固定液中固定；将鼠肝组织标本进行常规冰冻切片，取材、普通胶水包冰冻切片、染色后封片；对模型小鼠常规进行病理检查‑‑‑‑‑‑H&E染色鼠肝组织以油红O法进行脂肪染色，动态分析肝组织脂肪堆积；对对照小鼠常规进行病理检查‑‑‑‑‑‑‑H&E染色鼠肝组织以油红O法进行脂肪染色，动态分析肝组织脂肪；将f）和g）步骤中得出的动态分析肝组织脂肪进行对比，得出脂肪酸及总脂肪酸动态变化，模型建立过程中肝组织脂肪积累，肝组织长链脂肪酸、短链脂肪酸及总脂肪酸、外周血中、长链脂肪酸、短链脂肪酸及总脂肪酸水平改变。