[发明专利]一种复方矮地茶片的定性定量检测方法

摘要

本发明公开了一种复方矮地茶片的定性定量检测方法，改进了复方矮地茶片中矮地茶的显微鉴别，增加了复方矮地茶片中矮地茶、野菊花、甘草的薄层鉴别，建立了复方矮地茶片中岩白菜素的含量测定方法；鉴别：采用显微鉴别法鉴别矮地茶，薄层色谱法鉴别矮地茶、野菊花、甘草；含量测定：采用高效液相色谱法测定矮地茶中岩白菜素的含量；每片含矮地茶以岩白菜素(C₁₄H₁₆O₉)计，不得少于1.5mg。本发明方法可增加该产品的质量可控性，克服现有技术的不足，以便能够更好的保证疗效，更好的为广大患者服务。

主权项

一种复方矮地茶片的定性定量检测方法，其特征在于包括（1）采用显微鉴别矮地茶，采用薄层色谱法鉴别矮地茶、野菊花、甘草，（2）采用高效液相色谱法测定矮地茶中岩白菜素的含量，所述定性定量检测方法包含如下步骤：（1）鉴别：矮地茶的显微鉴别包括下列步骤：取本品，置显微镜下观察：螺纹导管直径7.5～25μm，纤维成束，壁较厚，草酸钙方晶直径7.5～26μm（矮地茶）；矮地茶的薄层鉴别包括下列步骤：取本品2片，除去包衣，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml，作为供试品溶液；另取岩白菜素对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液3～5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）‑乙酸乙酯‑甲醇（9∶8∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁‑1%铁氰化钾（1∶1）的混合溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；野菊花的薄层鉴别包括下列步骤：取本品3片，除去包衣，研细，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至约2ml，作为供试品溶液；另取蒙花苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液1～2µl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯‑丁酮‑三氯甲烷‑甲酸‑水（15∶15∶6∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；甘草的鉴别包括下列步骤：取本品20片，除去包衣，研细，加乙醚40ml，超声处理15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用以水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用以正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，弃去水液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1g，加乙醚40ml，超声处理15分钟，滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用以水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用以正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，弃去水液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以乙酸乙酯‑甲酸‑冰醋酸‑水（15∶1∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；（2）含量测定：矮地茶中岩白菜素的含量测定方法包括下列步骤：照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）测定；色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇‑水（20∶80）为流动相；检测波长为275nm，理论板数按岩白菜素峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备：取岩白菜素对照品适量，精密称定，加80％甲醇制成每1ml含50µg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.15g，精密称定，置25ml量瓶中，加80％甲醇20ml，超声处理（功率300W，频率40kHz）45分钟，放冷，加80％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得：测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；复方矮地茶片每片含矮地茶以岩白菜素(C₁₄H₁₆O₉)计，不得少于1.5mg。