[发明专利]一种3个运动能力相关基因的PCR-LDR检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种利用LDR法同时检测3个运动机能相关基因的联合检测试剂盒，该试剂盒可在3个小时内同时检测三个运动机能相关基因中的3个热点突变，该试剂盒包括PCR扩增试剂和LDR反应试剂；所述PCR扩增试剂包括：PCR缓冲液、MgCl2和dNTPs的反应混合物，Taq酶，超纯水，高特异性扩增ACTN3、EPO、CKMM三个基因中3个热点突变的引物混合物；所述LDR反应试剂试剂包括：PCR产物、10×连接缓冲液、LDR探针、Taq DN A连接酶等。一共包括3对PCR引物和3组检测探针。本试剂盒能完成一次性获得3个关键与运动能力显著相关基因的基因型，实现了对运动能力的高通量筛查。

主权项

一种同时检测3个运动基因的PCR‑LDR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包装盒体(1)，PCR扩增和LDR反应试剂； 所述PCR扩增试剂分别为PCR扩增Reaction Mix(2)和(3)；所述LDR反应试剂为LDR反应Probe Mix(4)和(5)； 所述3个运动能力相关基因为ACTN3C＞T，CKMM A＞G，EPO T＞G； 实验所需模板和引物如下： 其中用于ACTN3基因引物序列如下： ACTN3_M：5’P‑GTAGAGCTCGGGTTGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTCGCACCTACTCATACC ACTN3_C：TTTTTTTTTTCCAAATGACCGTCCCTACTCT ACTN3_T：TTTTTTTTTTTTTCCCCCTATATCACCATCCGCCTAA 用于CKMM基因引物序列如下： CKMM_M：5’P‑TGGGACTTCTGCTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAGCACCCTGCTACC CKMM_A：TTTTTTTTTTTTTTCACTAGATTACTTACCTAAGATCACCAACA CKMM_G：TTTTTTTTTTTTTTTTTTGACCCTCCATTATCTCTCAGGCC 用于EPO基因引物序列如下： EPO_M：5’P‑TTCATATTGAAGCGAGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTAAGCGCTCTTATG EPO_T：TTTTTTTTTTTTTTCTGCATGAGGTCTGGACGGTAG EPO_G：TTTTTTTTTTTTTTTTTCAGCCATCAGCCGTACAGGGCG。