[发明专利]一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用有效
申请号: | 201310341471.4 | 申请日: | 2013-08-06 |
公开(公告)号: | CN103397046A | 公开(公告)日: | 2013-11-20 |
发明(设计)人: | 孙永华;熊凤;魏志强;朱作言 | 申请(专利权)人: | 中国科学院水生生物研究所 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66;C12Q1/68 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430071 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种定向筛选同源重组PGC的载体及制备方法和应用,将表达框UAS:mRFP-UTRnos1和表达框UAS:puma-UTRnos1串联构建出一种可定向筛选同源重组PGC的载体p(UAS:mRFP,UAS:puma),其序列为SEQIDNO.1所示。该载体具有荧光特异高效标记PGC的作用,又具有促凋亡基因特异剔除PGC的作用。以p(UAS:mRFP,UAS:puma)为载体骨架,将打靶基因同源序列的左右臂分别置于表达框UAS:mRFP-UTRnos1的两侧,并且使表达框UAS:puma-UTRnos1位于同源序列的外侧,制备出同源重组载体。在Tg(kop:KalTA4)胚胎中导入同源重组载体,挑选出在PGC中表达mRFP的胚胎,即为在生殖细胞中发生了同源重组的胚胎。 | ||
搜索关键词: | 一种 定向 筛选 同源 重组 pgc 载体 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种人工合成的载体,其特征在于载体p(UAS:mRFP, UAS:puma),其序列为SEQ ID NO.1所示。
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