[发明专利]一种连续制备他汀药物中间体(R)-3-羟基戊二酸乙酯的方法

摘要

本发明公开了一种连续制备他汀药物中间体(R)‑3‑羟基戊二酸乙酯的方法，包括以下工艺步骤：第一步(S)‑4‑氯‑3羟基丁酸乙酯（(S)‑CHBE）在含有重组卤醇脱卤酶（HHDH）的催化下生成(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯，第二步(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯在重组腈水解酶（NIT）的催化下生成(R)‑3‑羟基戊二酸乙酯，所述的两个反应步骤均在反应罐中的水溶液中催化反应；本发明通过两步耦联生物催化反应，采用特定的卤醇脱卤酶和腈水解酶，连续催化制备他汀类药物的关键中间体，两步串联的连续绿色催化反应，无需提出中间体即可进行下一步反应，可连续操作、设备利用率高、成本低、简便易操作。

主权项

1.一种连续制备他汀药物中间体(R)‑3‑羟基戊二酸乙酯的方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：第一步(S)‑4‑氯‑3羟基丁酸乙酯（(S)‑CHBE）在含有重组卤醇脱卤酶HHDH的催化下生成(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯，第二步(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯在重组腈水解酶NIT的催化下生成(R)‑3‑羟基戊二酸乙酯，所述的两个反应步骤均在反应罐中的水溶液中催化反应；所述的制备方法为：1）以(S)‑4‑氯‑3羟基丁酸乙酯为底物加入含氰化钠水溶液的反应罐1中，接着加入重组卤醇脱卤酶进行催化反应；重组卤醇脱卤酶的用量为底物质量的2％～15％w/w，氰化钠的用量为底物质量的5％～20％w/w；所述反应在pH为6.0～8.0 的水相中进行，反应体系的温度为40～55℃；当通过气相色谱法测得混合液体中的底物转化率大于95%时，开始通过添加管路流加底物(S)‑CHBE和卤醇脱卤酶液，同时打开两个反应罐间的流量调节阀，保持反应罐1中的反应体积不变；2）在反应罐2中起始加入腈水解酶缓冲液到最低搅拌叶处，调节反应温度至25～30℃，当从反应罐1中开始流出含中间体(R)‑4‑氰基‑3‑羟基丁酸乙酯的反应液时，同时向反应罐2中加入腈水解酶粗酶液；腈水解酶粗酶液的用量为底物质量的20% ～60%；收集反应罐2产物出口管流出的反应液，调节反应液pH至2.0，硅藻土过滤除酶，等体积乙酸乙酯萃取水相3次，合并有机相，无水硫酸钠除水，旋蒸，即得产品(R)‑3‑羟基戊二酸乙酯。