[发明专利]一种暗紫贝母的促生栽培方法

摘要

本发明公开了一种暗紫贝母的促生栽培方法，包括材料的选择与消毒、材料的处理、初代培养、继代培养、生根培养、生根试管苗温室炼苗移栽、土壤基质管理等步骤，本发明采用新鲜的暗紫贝母鳞茎球作为外植体进行繁殖，鳞茎球的利用率很高，达到95%以上，并且培育出来的植株枝叶茂盛，根系发达，植株生长旺盛；一个直径4cm鳞茎球大约能够繁殖150-200个小鳞茎，即能够利用有限的资源进行繁殖，繁殖系数很高。在继代培养过程中当愈伤组织分化出细芽后，升高培养温度，提高光照周期和光照强度，提高土壤肥力、病虫害控制率，这样缩短了培养时间。

主权项

一种暗紫贝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）材料的选择与消毒：首先选用生长健壮、成熟的新鲜的暗紫贝母鳞茎球，剥去鳞茎最外层干皱的鳞片和基部残余老根，流水冲洗30 min后放入清水中浸泡15min，用50％多菌灵500倍液浸泡20‑30 min后，将鳞茎球一层一层的剥开，再在紫外灯下照射20 min，继而转入超净工作台，在超净工作台上先用70‑75 %的乙醇浸泡10秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了2～3滴土温80的0.1 %的升汞溶液中浸泡5min，用无菌水冲洗4次；（2）材料的处理：将消毒处理好的鳞片用无菌滤纸吸干，在无菌条件下将材料按照上、中、下部还有基部分割开来，分别切成4‑6mm的小块；（3）初代培养：在无菌的条件下将步骤（2）得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在在MS常规培养基中添加了1.0mg/L的6‑BA、1.2mg/L的NAA、 0.4mg/L的ZT；培养温度为26℃，光照时间14 h/d，光照强度22 00 Lx，PH为 6.5，琼脂5 g/L，经过15‑20天形成愈伤组织；（4）继代培养：将初代培养的愈伤组织切下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS常规培养基中添加了0.5mg/L的6‑BA、0.4 mg/L的NAA、0.3mg/L的KT和30mg/L的蔗糖，培养温度为22℃，光照周期13h/d，光强度为2500lux，PH 6.5，经过4‑5天时间分化出细芽后，升高培养温度到25℃，光照周期为14h/d，光强度为2800lux，继续培养6‑10天便可分化出一簇一簇的小鳞茎；（5）生根培养：将分化出来的小鳞茎一个个分别接种于下列诱导培养基中进行生根诱导： MS培养基+1.5mg/L的活性炭+6g/L的琼脂+0.3mg/L 的IBA+0.4mg/L的KT，培养温度为23℃，光照周期12h/d，光强度为2000lux，PH值为6.0，经过20‑25天待小鳞茎长至3cm高，当根系比较健壮并且长出6‑10个根时，即开始下一个阶段；（6）土壤基质管理：调节土壤pH 值为7.0～8.2，将硫磺粉过筛后与5 倍体积细土混匀后施用，除了用硫磺粉调节土壤pH 值外，硫磺粉与草炭混合施用效果则更佳，或者使用松针配合硫磺粉对土壤进行改良，其中松针、原土、粪肥、硫磺粉按照重量份数比2：3：1：2, 或者土壤中施入锯未、草炭、苔藓和硫磺粉进行土壤改良，其中锯未、草炭、苔藓和硫磺粉的重量份数比为1：1：1：2；增加土壤有机质含量：挖宽50 cm、深40 cm 的定植沟，有机质、有机肥、原土按1:1:1的比例进行改土，有机质用酸性草炭，如果用锯末、树皮必须先堆放1月以上，完全腐熟分解后再使用，如用人畜粪尿腐熟或植物秸秆叶子腐烂腐熟后形成的天然肥料，注意不要掺入草木灰、石灰碱性物质，含量达到3%～5%以上, 以增加土壤的通透性；土壤覆盖: 土壤覆盖在苗木定植后即可进行，将覆盖物均匀覆盖在床面，宽1 米、厚5 ～ 10 厘米，以后每年再覆盖2 厘米厚，以保持原有厚度，如果应用未腐烂分解的新锯末，需增施50%的氮肥，腐烂分解好的锯末，氮肥用量应相应地减少，覆盖黑地膜可以防止土壤水分蒸发，控制杂草，提高地温，最好是在有滴灌设施的果园应用，覆盖黑地膜与覆盖有机物相结合效果更佳或者定植前用除草剂杀灭杂草, 定植后全垦园地播撒绿肥白三叶、红三叶等豆科植物, 3月后可完全覆盖园地, 又能增加土壤肥力；（7）生根试管苗温室炼苗移栽：将生根的试管苗开瓶后置温室温度在25‑28℃，湿度80‑85％，光照强度在5000‑5500lx条件下炼苗3‑5天后，洗掉苗上的培养基，将其移栽到上述步骤（5）中的土壤基质中；当外界夜间温度在10‑15℃，白天温度在18‑25之间时把试管苗进行移栽，在移栽初期的5天内，用塑料薄膜覆盖，以保持湿度在80%以上，并且控制光照强度在2700‑3300lx，之后逐渐揭去薄膜并适当增加光照，直至将移栽苗置于自然条件下。