[发明专利]一种电化学基因传感器法检测人乳头瘤病毒20种分型的试剂盒

摘要

人乳头瘤病毒(HPV)是一种诱发外生殖器良性病变和女性子宫颈癌的主要病原体。HPV分为低危型和中高危型HPV。低危型HPV常引起外生殖器尖锐湿疣等良性病变；而中高危型HPV与宫颈癌及宫颈上皮内病变的发生密切相关。因此，有针对性地进行HPV的分型检测，对于宫颈癌的早期诊断和治疗具有一定的临床意义。本发明针对HPV基因组晚期区L1区设计特异引物和20型信号探针，将信号探针分别固定在印刷电路板金电极表面，制备成电化学传感器，用于捕获PCR多重扩增产物。由于信号探针标记有二茂铁分子，通过夹心杂交产生电流的变化，应用电化学基因传感器分析系统检测出电流值，最后进行人乳头瘤病毒基因型别判定。

主权项

一种电化学基因传感器法检测人乳头瘤病毒20种分型的试剂盒，该试剂盒包括：PCR扩增反应液、PCR扩增反应酶系、电化学杂交液、人乳头瘤病毒阳性质控品和阴性质控品。其中PCR扩增反应液由PCR反应缓冲液、镁离子溶液、能够分别与20个不同型别的双链靶多核苷酸的第一条链结合的10条正向引物、能够分别与20个不同型别的双链靶多核苷酸的第二条链结合的27条反向引物组成；PCR扩增反应酶系由Taq酶、UNG酶和dNTPs组成；电化学杂交液由杂交液I、杂交液II、杂交液III组成。