[发明专利]一种重组酪氨酸脱羧酶的可溶性高表达的方法及该酶的应用有效
| 申请号： | 201310367673.6 | 申请日： | 2013-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN103421734A | 公开（公告）日： | 2013-12-04 |
| 发明（设计）人： | 倪晔;章凯 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/60;C12N15/70;C12N9/88;C12P13/00;A61K38/51;A61P25/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人： | 时旭丹;刘品超 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种重组酪氨酸脱羧酶的可溶性高表达的方法及该酶的应用，属于酶工程技术领域。本发明公开了一株重组表达短乳杆菌酪氨酸脱羧酶TDC的基因工程菌E.coliBL21(DE3)/pET24-TDC，该基因工程菌的构建方法，高表达可溶性TDC的方法，及该酶的应用。将TDC编码基因连接表达载体并转入大肠杆菌表达宿主，通过在发酵培养基中添加葡萄糖显著提高了重组TDC（rTDC）的可溶性表达，蛋白产量达到224mg/L发酵液。采用Ni柱纯化C端带有His-Tag的rTDC，回收率90%。rTDC对于底物L-酪氨酸的比酶活为133.5U/mg。本发明的重组表达可溶性rTDC的方法具有表达水平高、纯化简单、回收率高、成本低等优点，可用于制备酪胺、多巴胺以及帕金森病的治疗研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 酪氨酸 脱羧酶 可溶性 表达 方法 应用 | ||
【主权项】：
一株重组表达短乳杆菌酪氨酸脱羧酶TDC的基因工程菌E. coli BL21 (DE3)/pET24‑TDC，其特征在于，该基因工程菌携带TDC基因的重组表达载体pET24‑TDC，所述的TDC基因核苷酸序列如SEQ ID No. 1所示；表达载体为pET‑24a，表达宿主为大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。
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