[发明专利]结核感染T细胞免疫的四聚体检测方法无效

专利信息
申请号: 201310374904.6 申请日: 2013-08-26
公开(公告)号: CN104422766A 公开(公告)日: 2015-03-18
发明(设计)人: 李皑 申请(专利权)人: 上海印维实业有限公司
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569
代理公司: 上海新天专利代理有限公司 31213 代理人: 徐伟奇
地址: 201703 上海市青浦*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开一种结核感染T细胞免疫的四聚体检测方法,从全血样本中分离出外周血单个核细胞,将其与结核杆菌特异性抗原一起孵育,当外周血中存在针对结核杆菌的效应T淋巴细胞时,结核杆菌特异性抗原中的TCR与MHC-多肽复合物结合,借助生物素-链霉亲和素系统,将MHC-多肽复合物形成四聚体分子,单个MHC-多肽四聚体分子与T细胞表面的多个TCR结合,以提高了MHC-多肽复合物与TCR的亲和力和稳定性;再加入生物素标记的检测抗体标记有PE荧光染料;最后通过流式细胞仪对特异T细胞进行计数以对结核病进行辅助诊断,本发明检测灵敏度和准确性和产品特异性高、应用方便简单,安全可靠。
搜索关键词: 结核 感染 细胞 免疫 体检 方法
【主权项】:
一种结核感染T细胞免疫的四聚体检测方法,其特征在于:从全血样本中分离出外周血单个核细胞,即PBMCs,将其与结核杆菌特异性抗原一起孵育,当外周血中存在针对结核杆菌的效应T淋巴细胞时,结核杆菌特异性抗原中的TCR与MHC‑多肽复合物结合,借助生物素‑链霉亲和素系统,将MHC‑多肽复合物形成四聚体分子,单个MHC‑多肽四聚体分子与T细胞表面的多个TCR结合,以提高了MHC‑多肽复合物与TCR的亲和力和稳定性;再加入生物素标记的检测抗体标记有PE荧光染料;最后通过流式细胞仪对特异T细胞进行计数以对结核病进行辅助诊断。
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