[发明专利]富铁水稻快速筛选方法无效

专利信息
申请号: 201310386023.6 申请日: 2013-08-29
公开(公告)号: CN103439327A 公开(公告)日: 2013-12-11
发明(设计)人: 石春海;王克敏;吴建国 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: G01N21/78 分类号: G01N21/78
代理公司: 杭州中成专利事务所有限公司 33212 代理人: 金祺
地址: 310058 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种富铁水稻快速筛选方法,待测水稻为以标准品水稻为基础进行突变或改良所得的水稻,将待测水稻籽粒和标准品水稻籽粒分别进行如下步骤1)~步骤4);1)籽粒糊化;2)在步骤1)的所得物中加入盐酸进行中和;3)在步骤2)的所得物中加入氯化羟胺水溶液、乙酸-乙酸钠缓冲液、乳化剂OP水溶液等振荡摇匀后静止;4)在步骤3)的所得物中加入BPT染色液,振荡摇匀后静止;取位于上层的清液; 5)将步骤4)所得的待测水稻籽粒的反应物和标准品水稻籽粒的反应物进行颜色的比较;如果待测水稻籽粒的反应物的颜色比标准品水稻籽粒的反应物颜色深,则说明待测水稻籽粒的含铁量高于标准品水稻。
搜索关键词: 铁水 快速 筛选 方法
【主权项】:
富铁水稻快速筛选方法,其特征是:待测水稻为以标准品水稻为基础进行突变或改良所得的水稻,将待测水稻籽粒和标准品水稻籽粒分别进行如下步骤1)~步骤4);1)、籽粒糊化:在4粒水稻籽粒中加入质量浓度为4%的NaOH溶液0.8~1.2 mL,在恒温培养箱中于34.5~35.5℃糊化5.5~6.5h,取出后于振荡器上震荡1.5~2.5min,振荡频率为300~350r/min;2)、在步骤1)的所得物中加入0.4~0.6 mL 浓度为2M的盐酸进行中和;3)、在步骤2)的所得物中加入质量浓度为10%的氯化羟胺水溶液0.2~0.3mL、乙酸‑乙酸钠缓冲液(pH 4.5)0.7~0.8 mL、质量浓度为20%的乳化剂OP水溶液0.9~1.1mL;然后用浓度为5M的NaOH溶液调节pH为4.0~5.0,振荡摇匀后静止8~12min;4)、在步骤3)的所得物中加入0.2~0.3mL的BPT染色液,振荡摇匀后静止8~12min;取位于上层的清液;从而分别获得待测水稻籽粒的反应物和标准品水稻籽粒的反应物;所述BPT染色液为BPT的质量浓度为0.1%的乙醇溶液;BPT为4,7‑二苯基1,10‑邻菲罗啉;5)、将步骤4)所得的待测水稻籽粒的反应物和标准品水稻籽粒的反应物进行颜色的比较;如果待测水稻籽粒的反应物的颜色比标准品水稻籽粒的反应物颜色深,则说明待测水稻籽粒的含铁量高于标准品水稻。
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