[发明专利]一种疏螺旋体BSK贮存液培养基及单菌落分离纯化方法和应用

摘要

本发明公开了一种疏螺旋体BSK贮存液培养基及单菌落分离纯化方法和应用，培养基由CMRL-1066、牛血清白蛋白V、新胨蛋白胨、羟乙基哌嗪乙硫磺酸、柠檬酸钠、葡萄糖、酵母粉、碳酸氢钠、丙酮酸钠、乙酰葡萄糖氨、兔血清、氢氧化钠等组成。配置BSK贮存液培养基，制备琼脂糖凝胶并高压灭菌，逐渐融化，按照比例与BSK贮存液培养基混合均匀，倾倒制备下层固体培养基。用梯度稀释的伯氏疏螺旋体菌悬液与贮存液培养基混合，倾注上层培养基。出现肉眼可见的单菌落，用牙签挑取菌落用暗视野显微镜检查，观察到典型的伯氏疏螺旋体菌株，该方法操作简单快速，结果明晰。并且遗传背景均一无异质性，适用于后续的科学研究及作为标准品菌株。

主权项

一种BSK贮存液培养基，它由以下重量份的原料制成：原料                                        重量份CMRL‑1066                             8－11 g；牛血清白蛋白V                     45－55 g；新胨蛋白胨                             3－6 g；羟乙基哌嗪乙硫磺酸             5.5－7.5 g；柠檬酸钠                                      0.4－1.2 g；葡萄糖                                     3.5－10 g；酵母粉                                       1－3 g；碳酸氢钠                                  1.5－3.2 g；丙酮酸钠                                  0.5－1.2 g；乙酰葡萄糖氨                         0.2－0.6 g；兔血清                                    30－70毫升；氢氧化钠调整培养基pH值     7－7.8；蒸馏水                               定容至500毫升。