[发明专利]一种利用靛蓝染料快速检测食品中蛋白质的方法

摘要

本发明公开了一种利用靛蓝染料快速检测食品中蛋白质的方法。利用靛蓝与牛血清蛋白通过静电作用和疏水作用力形成聚集体，造成靛蓝的共振光散射强度发生相应的增强，从而建立了一种测定食品中蛋白质含量的方法。靛蓝的共振光散射信号增加值与待测牛血清蛋白的浓度在2×10-8~6×10-7摩尔/升（1.3×10-3~3.9×10-2克/升）范围内呈良好的线性关系，方法检出限为6×10-9摩尔/升（3.9×10-4克/升）。本发明克服了已有技术在检测时存在灵敏度低、应用范围窄等缺点，提高了灵敏度和选择性，对于食品中低浓度蛋白质的检测更加方便快速。

主权项

一种利用靛蓝染料快速检测食品中蛋白质的方法，其特征在于具体步骤为：（1）检测方法：在12支10 毫升比色管中各加入1.00毫升1.0×10‑4摩尔/升的靛蓝溶液，然后分别加入20、60、100、140、180、220、260、340、420、500、580、600微升1.0×10‑3摩尔/升的牛血清蛋白溶液，再分别用pH＝4.5、浓度为0.05 摩尔/升的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液定容至刻度，反应3分钟后用荧光光度计进行共振光强度检测，令激发波长同发射波长相同，激发和发射狭缝宽度均为5纳米；（2）工作曲线的绘制：在12支10 毫升比色管中各加入1.00毫升1.0×10‑4摩尔/升的靛蓝溶液，然后分别加入20、60、100、140、180、220、260、340、420、500、580、600微升1.0×10‑3摩尔/升的牛血清蛋白溶液，再分别用pH＝4.5、浓度为0.05 摩尔/升的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液定容至刻度，充分摇匀后放置反应3分钟，进行共振光强度检测；牛血清蛋白的浓度c在2×10‑8~6×10‑7 摩尔/升即1.3×10‑3~3.9×10‑2 克/升范围内与荧光增敏量△IF呈良好的线性关系，其线性回归方程为：ΔI=0.8654c+75.786，线性相关系数r = 0.9987。