[发明专利]一种冬虫夏草优质菌种的选育方法

摘要

本发明公开一种冬虫夏草优质菌种的选育方法，主要解决现在规模化生产冬虫夏草菌丝进行冬虫夏草深层发酵生产过程中，普遍存在缺乏优质菌种的问题。本发明的菌种选育方法包括以下步骤：从冬虫夏草产区采收新鲜冬虫夏草，在经过优选配置的固体培养基中进行组织分离，模拟天然环境采用12小时光照与12小时黑暗间隔培养，培养温度为10-20℃。采用不同的固体培养基转接2次，进行富营养刺激，实时记录冬虫夏草菌丝形态和生长特点，从中选择优良的冬虫夏草菌株进行工业生产。本发明具有的积极效果：性能好，活力强，发酵物产量高、质量好，能很好满足工业生产要求。

主权项

一种冬虫夏草优质菌种的选育方法，其特征在于包括以下步骤：（1）新鲜冬虫夏草采收：每年在青藏高原主产区采收新鲜的冬虫夏草，以保证获得生长旺盛的菌种；（2）初始菌种分离：采收的新鲜冬虫夏草用浓度70%的酒精浸泡2‑5min，用酒精棉球擦拭表面消毒，取直径0.5‑1cm的冬虫夏草的虫子致密组织接入固体培养基上培养；模拟天然环境采用12小时光照与12小时黑暗间隔培养，培养温度为10‑20℃，期间测量菌丝生长速度，用显微镜观察菌丝特点；初始分离固体培养基的优选成分重量配比为：2‑4%的粗粮复合物、0.30‑0.60%的胰蛋白胨、0.30‑0.60%的酵母浸出粉、0.02‑0.04%的硫酸镁，0.02‑0.04%的磷酸二氢钾、0.05‑0.10%的维生素B1、0.05‑0.10%的维生素B2、1.00‑2.00%的琼脂粉，其余为水分；粗粮复合物为玉米、小米、荞麦、燕麦、黄豆粗制粉同等比例混合而成；（3）第一次菌种转接：初始分离菌种培养30天后，进行第一次菌种转接，模拟天然环境采用12小时光照与12小时黑暗间隔培养，培养温度为10‑20℃，期间测量菌丝生长速度，用显微镜观察菌丝特点；第一次菌种转接后固体培养基成分重量配比为：2‑4%的粗粮复合物、0.30‑0.60%的胰蛋白胨、0.30‑0.60%的酵母浸出粉、0.02‑0.04%的硫酸镁，0.02‑0.04%的磷酸二氢钾、0.05‑0.10%的维生素B1、0.05‑0.10%的维生素B2、1.00‑2.00%的琼脂粉、0.50‑1.50%的粗蛋白粉，其余为水分；（4）第二次菌种转接：第一次菌种转接培养30天后，进行第二次菌种转接，模拟天然环境采用12小时光照与12小时黑暗间隔培养，培养温度为10‑20℃，期间测量菌丝生长速度，用显微镜观察菌丝特点；第二次转接后培养30天，即可获得具有很高活性的优质冬虫夏草菌种，可用于发酵生产；第二次转接后的固体培养基成分重量配比为：2‑4%的粗粮复合物、0.30‑0.60%的胰蛋白胨、0.30‑0.60%的酵母浸出粉、0.02‑0.04%的硫酸镁，0.02‑0.04%的磷酸二氢钾、0.10‑0.20%的复合维生素、1.00‑2.00%的琼脂粉、0.50‑1.50%的粗蛋白粉，其余为水分。