[发明专利]灰树花265菌株粗多糖在抗禽流感H5N1病毒上的应用

摘要

本发明公开灰树花265菌株粗多糖在抗禽流感H5N1病毒上的应用，其方法包括灰树花发酵全液分离菌丝体或固体发酵后的菌丝体经过乙醇提取、过滤、减压浓缩、除色素、除小分子化合物、除脂肪、醇析、离心分离、收集物干燥、收集物粉碎等步骤。本发明的方法提取的灰树花发酵菌丝体粗多糖对禽流感病毒具有明显的抑制作用，该方法具有工艺简便、成本低、效果好的特点。

主权项

灰树花265菌株粗多糖在制备抗禽流感H5N1病毒药物上的应用，其特征是，所述灰树花265菌株粗多糖由下述方法制得：(1)加热提取：取经液体发酵的灰树花265菌株发酵全液或菌丝体或澄清液或者固体发酵的灰树花265菌株菌丝体放于容器内，加入纯净水调整其pH值为8～12，置60～120℃下加热100～240分钟； (2)过滤：之后冷却、以180～200目的筛网过滤灰树花菌丝体，收集滤液，滤渣以其4～8倍体积的蒸馏水稀释，重复上述操作1～2遍，再收集滤液；(3)减压浓缩：合并收集的滤液，在温度50～70℃，压力0.2～0.6Kg/cm²，真空度为0.02～0.06Mpa的条件下进行减压浓缩，使滤液浓缩至原有体积的1/10～1/20；(4)除色素：取浓缩后的提取液，用氨水调pH至6.0～8.0，于30～45℃下搅拌，按每10ml滴加1ml～2ml 10 %～30%的H₂O₂，进行脱色10～24h，得到淡黄色液体； (5)除小分子化合物：然后利用透析袋，截留分子量3000～5000以上，4℃～10℃条件下透析24h～48h，去除多余的H₂O₂、小分子化合物；(6)除脂肪：取上述提取液，装入索氏提取器,按1：0.5～1的比例加入石油醚，加热回流提取2～6h,待冷却后，弃去石油醚层，回收余下的提取液；(7)醇析：在回收的提取液中，加入量为其体积4～8倍的95%醇溶液并不断搅拌，搅拌速度为30～60r/min，10～20分钟后，静置24～48小时进行醇析；(8)离心分离：醇析后弃上清液，沉淀物移入离心管中，以转速为3000～5000r/min离心20～30min，离心后弃去上清液，收集离心沉淀物；(9)收集物干燥：将上述收集的离心沉淀物，在50～70℃温度条件下干燥36～48小时； (10)收集物粉碎：取上述烘干的收集物，进行粉碎，经200目筛网过筛后即为灰树花粗多糖；其中，所述的灰树花265发酵全液是指灰树花265菌株发酵液与菌丝体的集合体。