[发明专利]一种从蜜蜂球囊菌中提取新没药烷倍半萜的方法

摘要

本发明公开了一种从蜜蜂球囊菌中提取新没药烷倍半萜的方法，包括：1)活化菌株；2)初级培养；3)次级培养；4)减压抽滤得到菌液，菌液乙酸乙酯萃取；5)旋蒸浓缩；6)多次进行200~300目硅胶柱层析，经EI-MS、NMR、HMBC、NOESY谱图分析证明新没药烷倍半萜Ⅰ首次在该菌种代谢物中提取到。

主权项

一种从蜜蜂球囊菌中提取新没药烷倍半萜的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）将蜜蜂球囊菌活化后，取菌块接种到PDB培养基中，在140 r/min、25℃条件下培养4天，按10％接种量再次转接到PDB培养基中，在160 r/min、25℃条件下继续培养7天；2）抽滤得到菌液，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯萃取液旋蒸得菌液浸膏；3）将菌液浸膏上200~300目硅胶柱，进行粗分，先用石油醚洗脱，再之后换二氯甲烷：丙酮体积比=8:1和二氯甲烷：丙酮体积比5:1洗脱：收集并合并两部分的洗脱液，旋蒸浓缩； 4）将步骤3）中得到的浓缩物继续上200~300目硅胶柱，以二氯甲烷：丙酮体积比=30:1梯度洗脱，收集二氯甲烷：丙酮体积比=10:1部位洗脱液，旋蒸浓缩；5）将步骤4）中得到的浓缩物进一步上200~300目硅胶柱，先以石油醚洗脱，之后换石油醚：丙酮体积比=8：1梯度洗脱，最后以乙酸乙酯：丙酮体积比=5:1梯度洗脱，收集乙酸乙酯：丙酮体积比=3:1部位洗脱液，旋蒸浓缩，得到无色针状。