[发明专利]一种猪背膘厚性状的分子标记方法

摘要

本发明涉及一种猪背膘厚性状的分子标记方法。本发明方法包括猪基因组DNA的提取、长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）基因第17外显子引物设计、体外扩增和基因型检测。本发明首次发现长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）基因第17外显子的多态性与猪背膘厚存在着显著相关；并建立了检测第17外显子突变位点的限制性片段酶切多态性检测方法。本发明方法可以用于猪的育种中背膘厚性状的辅助选择，可实现种猪的早期选种，甚至在猪刚出生时就可准确地进行选留，缩短了世代间隔，加快背膘厚性状的选择进程；该方法操作简便，聚合酶链式反应过程中条件要求不高，扩增片段长度较短（292bp），扩增较容易，提高了扩增效率及判断基因型的准确性。

主权项

一种猪背膘厚性状的分子标记方法，其特征在于包括以下操作步骤：（1）猪基因组DNA的提取；（2）长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）基因第17外显子引物设计，所述引物为上游引物和下游引物，其序列如下：上游引物：5’‑ACAGGCTCACTTCGCAGGTAGAT‑3’，下游引物：5’‑GTTGGCTTGGAACCACTATTTGC‑3’；（3）体外扩增采用聚合酶链式反应，得到猪长链脂酰辅酶A合成酶1（ACSL1）基因第17外显子的体外扩增产物；（4）基因型检测 采用限制性内切酶酶切反应，得到酶切产物；对酶切产物进行多态位点限制性片段酶切多态性（RLFP）检测，选择其中条带为TT型个体留种；猪的ACSL1基因第17外显子Tasl限制性内切酶酶切图2中第5、6、8泳道条带为TT型，第1、3、7泳道条带为CC型，第2、4泳道条带为TC型，M泳道为DL 2000 Marker。