[发明专利]一种rDNA ITS2序列标记快速鉴定西施舌群体的方法有效
| 申请号： | 201310425234.6 | 申请日： | 2013-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN103497995A | 公开（公告）日： | 2014-01-08 |
| 发明（设计）人： | 陈淑吟;吉红九;陆勤勤;张美如 | 申请（专利权）人： | 江苏省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 226007 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种rDNA ITS2序列标记快速鉴定西施舌群体的方法，包括：（1）采集西施舌个体，提取DNA；（2）合成rDNA的ITS2序列标记引物；（3）对西施舌群体样品进行ITS2序列的PCR扩增；（4）对PCR产物进行纯化；（5）对纯化的PCR产物进行测序和序列比对，得出特异性位点，判断样品所属。本发明结果稳定，可重复性强，鉴别方法简单，对该贝类的种质资源保护和科学利用具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 rdna its2 序列 标记 快速 鉴定 西施 群体 方法 | ||
【主权项】：
一种rDNA ITS2序列标记快速鉴定西施舌群体的方法，包括：（1）采集不同群体的西施舌个体，取西施舌样品的闭壳肌组织，提取基因组总DNA，洗脱定溶于TE溶液或双蒸水中，‑20℃保存，备用时于4℃保存；（2）以ITS2‑F:5′‑GGGTCGATGAAGAACGCAG‑3′和ITS2‑R:5′‑GCTCTTCCCGCTTCACTCG‑3′为引物，进行ITS2序列的PCR扩增；然后PCR扩增产物经1.2%‑1.5%琼脂糖凝胶电泳进行检测，检测完毕进行切胶并利用PCR产物纯化试剂盒纯化回收，纯化产物进行双向测序列，其中无法直接测序的PCR产物，经克隆并进行菌落PCR检验后再测序；应用软件进行不同序列比对，得出特异性位点，判断样品所属。
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