[发明专利]一种癌性胸腹水来源的TIL细胞的高效扩增方法有效
申请号: | 201310452172.8 | 申请日: | 2013-09-28 |
公开(公告)号: | CN103468641A | 公开(公告)日: | 2013-12-25 |
发明(设计)人: | 徐矫健;孙威 | 申请(专利权)人: | 青岛麦迪赛斯生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266111 山东省青岛市青岛高新技术产*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明目的是提供一种癌性胸腹水来源的TIL细胞的高效扩增方法,本发明所制备出的TIL细胞具有增殖速度快、细胞数量大、细胞活性高等特点。本发明的主要特点是:利用层粘连蛋白和纤维连接蛋白包被的培养瓶对TIL进行培养,这两种蛋白的吸附作用可以使细胞成半贴壁状态,从而利于细胞接受各种因子的刺激,并且这两种蛋白本身就有对TIL细胞增殖的促进作用;而抗OX-40单克隆抗体的使用可以刺激TIL细胞中CD3+CD8+T细胞亚群的共刺激信号,促进细胞的活化,提高细胞穿孔素和颗粒酶的表达,增强其杀伤能力。到目前为止,仍未见有将层粘连蛋白、纤维连接蛋白和抗OX-40单克隆抗体联合应用于TIL细胞制备的研究报道,本发明首次提供出一种在TIL细胞制备中通过添加以上三种因子提高细胞数量和杀伤活性的方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 胸腹 来源 til 细胞 高效 扩增 方法 | ||
【主权项】:
一种TIL细胞的培养方法,包括如下的步骤:1)将层粘连蛋白和纤维连接蛋白溶解稀释后,加入到细胞培养瓶中包被;2)将从胸腹水分离得到的TIL细胞用培养液重悬后,接种到包被后的培养瓶中;添加IL‑2刺激;3)培养4天后,将细胞转移到透气的细胞培养袋中继续扩大培养,并添加抗OX‑40单克隆抗体;4)持续扩大培养至第20天时,完成高效TIL细胞的培养。
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