[发明专利]一种固态发酵生产益生菌孢子粉的方法

摘要

本发明公开了一种固态发酵生产益生菌孢子粉的方法，包括培养基制备、益生菌菌种活化、益生菌菌悬液的制备、益生菌固态发酵、益生菌孢子粉干燥、益生菌高孢粉抽提及粉碎和益生菌孢子粉成品质检及包装共7个步骤，该方法采用固态发酵制备益生菌孢子粉，降低了生产过程中杂菌的污染率，发酵过程能耗低；产物浓度高，提取工艺简单；整个生产过程零废液排放；该方法采用集发酵、干燥粉碎为一体的卧式固态生物反应器，简化操作工序，缩短了生产周期，节约能耗，提高生产效率。

主权项

一种固态发酵生产益生菌孢子粉的方法，其特征在于，包括以下步骤：a）培养基制备：茄子瓶培养基：组成成分为马铃薯20%、蛋白胨0.5%、葡萄糖或蔗糖2%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸镁0.03%、琼脂1.5~2%、pH为6.5~7.0；种子扩大培养的培养基：组成成分为米糠7~10%或麦麸2~10%、花生粕或豆粕2~5%、蛋白胨0.5~1.0%、蔗糖2%、琼脂2%，pH为6.0~7.0；固体发酵培养基：由稻壳和麦麸组成，组成比例为3:7~5:5，固体培养基的含水率为50% wt～60% wt，pH自然；b）益生菌菌种活化：将冷冻管中的菌体或斜面培养保存的菌种转接至茄子瓶内培养； c）益生菌种悬液的制备：将步骤b）培养好的细菌或真菌按1:100~1:50的接种量转接至种子罐中进行固态培养，罐压为0.05MPa，通风量为0.1~0.2vvm，搅拌速度为0.1~0.2rpm，细菌在34~39℃培养24~36h后转至适量的无菌水中，使菌悬液含菌量在1.0~1.5×107cfu/g；真菌在25~30℃培养44~60h至适量的无菌水中，使菌悬液含菌量在3.0~5.0×106cfu/g； d）益生菌固态发酵培养：将步骤c）得到的细菌菌悬液按固体发酵培养基的重量1~2%转接至固体发酵培养基中，罐压为0.02~0.05MPa，通风量为0.2~0.25vvm，搅拌速度为0.8~1.2rpm，培养温度为34~39℃，物料湿度控制在55~65%，45~55h内每2h取样检测物料的含菌量，当含菌量≥5.0×109cfu/g且活菌率高于95%时，停止发酵；将步骤c）得到的真菌菌悬液按固体发酵培养基的重量2~4%转接至固体发酵培养基中，罐压为0.02~0.05MPa，通风量为0.2~0.25vvm，搅拌速度为0.8~1.2rpm，培养温度为25~30℃，物料湿度控制在55~65%，57~66h内每2h取样检测物料的活菌量，当活菌量≥5.0×108cfu/g且活菌率高于95%时，停止发酵；e）益生菌孢子粉干燥及粉碎:在发酵结束后，将发酵罐的温度调至60℃、搅拌速度调至3~5rpm，干燥至孢子粉的含水率低于12%，并通过提高搅拌速度进行粉碎； f）益生菌高孢粉抽提：采用旋风分离集孢器进行抽提得到高孢粉，然后根据所需的含孢量，并在高孢粉中加入填充料，混合，再根据益生菌孢子粉的配方将细菌和真菌高孢粉按重量比例为8:2~5:5进行混合过筛得到益生菌孢子粉； g）益生菌孢子粉成品质检及包装。