[发明专利]一种基于酪胺信号放大技术和适配体识别的金黄色葡萄球菌可视化检测方法

摘要

本发明提供了一种基于酪胺信号放大技术和适配体识别的金黄色葡萄球菌可视化检测方法，本发明涉及到分子生物学和微生物学的方法及技术，属于生物技术领域。其方法主要是利用生物素标记的金黄色葡萄球菌的适配体能够特异性的识别和结合金黄色葡萄球菌，从而实现对菌体的捕获，通过亲和素与生物素的结合将菌体固定到包被链霉亲和素的酶标板的底部，然后再将生物素标记的适配体和Streptavidin-HRP的复合物固定到菌体表面。在H2O2的作用下，HRP催化沉积生物素-酪胺分子沉积在HRP周围的位点上，这时体系中再次加入Streptavidin-HRP，通过生物素与链霉亲和素的结合而导致HRP大量的结合在菌体上，从而使信号实现几何级的放大。本方法建立的方法能够对金黄色葡萄球菌实现快速、灵敏、准确的检测，对于食品安全有着重要的意义。

主权项

一种基于酪胺信号放大技术和适配体识别的金黄色葡萄球菌可视化检测方法，其特征在于：通过生物素修饰的金黄色葡萄球菌适配体将样品中的金黄色葡萄球菌捕获并将其固定到链霉亲和素包被的酶标板底部，另一条生物素标记的金黄色葡萄球菌的适配体将链霉亲和素标记的HRP(Streptavidin‑HRP)引入检测体系中，然后经过酪胺信号放大技术使信号实现几何级的放大，最后加入TMB显色试剂和终止液，利用酶标仪检测吸光度值，基于此建立检测的标准曲线，达到检测金黄色葡萄球菌的目的。