[发明专利]比伐芦定中间体的固相合成方法

摘要

本发明公开了比伐芦定中间体的固相合成方法。本发明提供了肽树脂18的固相合成方法：步骤1，非质子极性溶剂中，将有机碱与肽树脂17进行脱除脯氨酸芴甲氧羰酰基氨基保护基的反应，得到肽树脂17’；步骤2，在非质子极性溶剂中，缩合剂和催化剂存在的条件下，将步骤1中制得的肽树脂17’与Fmoc‑Arg(R₂)‑OH进行缩合反应，得到肽树脂18；所述的非质子极性溶剂为N,N‑二甲基甲酰胺和二氯甲烷的混合溶剂。本发明的固相合成方法可促进大位阻的氨基酸Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH顺利完成缩合反应，工艺简单、反应条件温和、转化率高、缩合率达到84%～100%、生产成本低、适合于大规模工业化生产。

主权项

1.一种肽树脂18的固相合成方法，其特征在于包括以下步骤：向肽树脂17中加入1000mL 20％哌啶/DMF溶液，在25℃搅拌10分钟，真空抽干，再加入1000mL 20％哌啶/DMF溶液，在25℃搅拌20分钟，真空抽干，用DMF洗涤一次，甲醇洗涤两次，DMF洗涤一次，二氯甲烷洗涤一次，真空抽干；加Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH(165.4mmol)107.3g，1‑羟基苯并三氮唑(330.8mmol)44.7g，800mL缩合反应溶剂，加入N,N‑二异丙基碳二亚胺(330.8mmol)51.8mL，将混合物在28℃搅拌24小时，茚三酮和四氯苯醌检测均呈弱阳性，真空抽干，甲醇洗涤一次，DMF洗涤两次，真空抽干；将上述得到的余留物进行后处理，所述后处理包括如下步骤：加吡啶(165.4mmol)13.3.mL，醋酸酐(165.4mmol)15.6mL，800mL DMF，将混合物在27℃搅拌2小时，茚三酮和四氯苯醌检测均呈阴性，真空抽干，用DMF、甲醇、DMF、DMF依次洗涤，真空抽干；甲醇洗涤一次，DMF洗涤两次，真空抽干；Pbf为2,2,4,6,7‑五甲基二氢苯并呋喃‑5‑磺酰基；所述缩合反应溶剂为DMF和二氯甲烷的混合溶剂，体积比为3:2；所述肽树脂17为Fmoc‑Pro‑Gly‑Gly‑Gly‑Gly‑Asn(Trt)‑Gly‑Asp(OtBu)‑Phe‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Ile‑Pro‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Tyr(tBu)‑Leu‑Wang树脂。