[发明专利]鉴定待测品种是否为瑞杂816的方法及其专用引物组

摘要

本发明公开了一种鉴定待测品种是否为瑞杂816的方法及其专用引物组。本发明提供的方法包括如下步骤：以待测棉花的基因组DNA为模板，分别采用CS62引物对、NAU1103引物对、NAU1186引物对、NAU1233引物对、NAU2026引物对、NAU2274引物对、CIR062引物对、NAU1071引物对、NAU1085引物对、NAU1102引物对、NAU1196引物对、NAU1255引物对、NAU1369引物对、NAU2173引物对和NAU2277引物对进行PCR扩增，如果PCR扩增产物满足标准（1）至标准（15）中的13条以上，待测棉花为瑞杂816。本发明对于监控瑞杂816的制种的质量，保证销售的瑞杂816种子的质量，同时打击假冒的瑞杂816种子，保护育种人的知识产权，保护品种权具有重大价值。

主权项

一种鉴定或辅助鉴定待测棉花是否为瑞杂816的方法，包括如下步骤：以待测棉花的基因组DNA为模板，分别采用CS62引物对、NAU1103引物对、NAU1186引物对、NAU1233引物对、NAU2026引物对、NAU2274引物对、CIR062引物对、NAU1071引物对、NAU1085引物对、NAU1102引物对、NAU1196引物对、NAU1255引物对、NAU1369引物对、NAU2173引物对和NAU2277引物对进行PCR扩增，如果PCR扩增产物满足标准（1）至标准（15）中的13条以上，待测棉花为瑞杂816或待测棉花为候选的瑞杂816；所述CS62引物对由序列表的序列1所示的单链DNA分子和序列表的序列2所示的单链DNA分子组成；所述NAU1103引物对由序列表的序列3所示的单链DNA分子和序列表的序列4所示的单链DNA分子组成；所述NAU1186引物对由序列表的序列5所示的单链DNA分子和序列表的序列6所示的单链DNA分子组成；所述NAU1233引物对由序列表的序列7所示的单链DNA分子和序列表的序列8所示的单链DNA分子组成；所述NAU2026引物对由序列表的序列9所示的单链DNA分子和序列表的序列10所示的单链DNA分子组成；所述NAU2274引物对由序列表的序列11所示的单链DNA分子和序列表的序列12所示的单链DNA分子组成；所述CIR062引物对由序列表的序列13所示的单链DNA分子和序列表的序列14所示的单链DNA分子组成；所示NAU1071引物对由序列表的序列15所示的单链DNA分子和序列表的序列16所示的单链DNA分子组成；所述NAU1085引物对由序列表的序列17所示的单链DNA分子和序列表的序列18所示的单链DNA分子组成；所述NAU1102引物对由序列表的序列19所示的单链DNA分子和序列表的序列20所示的单链DNA分子组成；所述NAU1196引物对由序列表的序列21所示的单链DNA分子和序列表的序列22所示的单链DNA分子组成；所示NAU1255引物对由序列表的序列23所示的单链DNA分子和序列表的序列24所示的单链DNA分子组成；所述NAU1369引物对由序列表的序列25所示的单链DNA分子和序列表的序列26所示的单链DNA分子组成；所述NAU2173引物对由序列表的序列27所示的单链DNA分子和序列表的序列28所示的单链DNA分子组成；所述NAU2277引物对由序列表的序列29所示的单链DNA分子和序列表的序列30所示的单链DNA分子组成；标准（1）：采用CS62引物对时，满足如下带型：在489bp和404bp之间具有2条带、在404bp和353bp之间具有2条带、在242bp和190bp之间具有3条带；标准（2）：采用NAU1103引物对时，满足如下带型：在353bp和242bp之间具有4条带、在242bp和190bp之间具有1条带、在190bp和147bp之间具有2条带；标准（3）：采用NAU1186引物对时，满足如下带型：在404bp和353bp之间具有3条带、在353bp和242bp之间具有2条带、在190bp和147bp之间具有3条带；标准（4）：采用NAU1233引物对时，满足如下带型：大于501bp具有1条带，在501bp和489bp之间具有1条带、在489bp和404bp之间具有2条带、在353bp和242bp之间具有2条带；标准（5）：采用NAU2026引物对时，满足如下带型：在489bp和353bp之间具有5条带、在353bp和242bp之间具有1条带、在242bp和190bp之间具有2条带、在190bp和147bp之间具有1条带；标准（6）：采用NAU2274引物对时，满足如下带型：在190bp和147bp之间具有3条带、在147bp和110bp之间具有5条带；标准（7）：采用CIR062引物对时，满足如下带型：在404bp和353bp之间具有2条带、在242bp和190bp之间具有3条带；标准（8）：采用NAU1071引物对时，满足如下带型：在353bp和242bp之间具有2条带、在190bp和147bp之间具有2条带；标准（9）：采用NAU1085引物对时，满足如下带型：在489bp和404bp之间具有1条带、在353bp和242bp之间具有2条带；标准（10）：采用NAU1102引物对时，满足如下带型：大于501bp具有2条带、在242bp和190bp之间具有2条带；标准（11）：采用NAU1196引物对时，满足如下带型：在489bp和404bp之间具有2条带、在242bp和190bp之间具有2条带；标准（12）：采用NAU1255引物对时，满足如下带型：在404bp和353bp之间具有1条带、在242bp和190bp之间具有2条带；标准（13）：采用NAU1369引物对时，满足如下带型：在489bp和404bp之间具有2条带、在242bp和190bp之间具有1条带；标准（14）：采用NAU2173引物对时，满足如下带型：在242bp和190bp之间具有1条带；标准（15）：采用NAU2277引物对时，满足如下带型：在242bp和190bp之间具有1条带、在147bp和110bp之间具有1条带。